少棘蜈蚣最细粉急性毒性和慢性毒性研究

摘要

目的：中药蜈蚣为传统的毒性动物药材，而临床常用其最细粉，即少棘蜈蚣最细粉，但蜈蚣体内所含的毒性成分使得机体中毒后常出现肝肾功能损害、神经系统中毒反应及过敏反应等。本文通过小鼠急性毒性试验及大鼠3月慢性毒性试验，探讨少棘蜈蚣最细粉的安全性，如毒性反应剂量、毒性反应的类型和可能的毒性靶器官，旨在为临床用药及确定安全剂量提供科学的实验依据。　　方法：(1)小鼠急性毒性试验：预试验结果发现少棘蜈蚣最细粉Dm（100％致死剂量）为12.00g/kg，Dn（0％致死剂量）为6.00g/kg，如果实验组数为6组，计算出剂量比r=1.148，从而正式实验剂量由低到高确定为：6.00g/kg、6.89g/kg、7.91g/kg、9.08g/kg、10.43g/kg、12.00g/kg。昆明种小鼠每组20只，分为6组，共120只，按雌雄各50％，苦味酸标记编号。将0.30g/ml的少棘蜈蚣最细粉混悬液等比稀释成6个浓度水平的混悬液，按给药容积0.4ml/10g，于24小时内，分别灌胃给药。观察并记录给药后14天的小鼠情况：毛色状况、精神状况、活动状况、饮食情况、排便情况，五官分泌物有无异常，毒性反应表现，毒性反应大小，毒性反应开始时间，维持时间等、中毒反应恢复情况，以及各组小鼠死亡率。采用LD50计算软件计算LD50（半数致死量）。(2)大鼠3月慢性毒性试验：SD大鼠120只，实验环境下喂养1周，随机分为阴性对照组，以及少棘蜈蚣最细粉高、中、低剂量组，每组雌性大鼠15只，雄性15只。连续灌胃不同剂量的少棘蜈蚣最细粉（0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg，分别为临床常用剂量10倍、20倍、40倍）和等容量的生理盐水。每日定时给药1次，每周给药5日，连续给药12周，于给药4周、12周和恢复2周，检测血液学指标：HCT（Hematocrit，红细胞比容）、MCH（mean corpuscular volume，红细胞平均血红蛋白量）、HGB（Hemoglobin，血红蛋白浓度）、LYMPH（Lymphocyte，淋巴细胞绝对值）、LYMPH％（Lymphocyte ratio，淋巴细胞比率）、MCHC（mean corpuscular hemoglobin concentration，红细胞平均血红蛋白浓度）、MCV（mean corpuscular volume，平均红细胞体积）、MONO％（Monocytes，单核细胞比率）、MPV（mean platelet volume，血小板平均体积）、NEUT％（Neutrophilic granulocyte，中性粒细胞比率）、PCT（Platelet hematocrit，血小板压积）、PDW（Platelet distribution width，血小板分布宽度）、PLT（Platelet，血小板计数）、RBC（Red blood cell，红细胞计数）、RDW（Red blood cell distribution width，红细胞分布宽度）、WBC（White blood cell，白细胞计数），检测生化指标：BUN(Blood urea nitrogen，血尿素氮)、ALB（Albumin，白蛋白）、ALT(Alanine aminotransrease，谷丙转氨酶)、AST（Aspartate aminotransferase，谷草转氨酶）、CK（Creatine kinase，肌酸激酶）、CREA（Creatinine，肌酐）、Glu（Glucose，葡萄糖）、TBIL（Total blood cell，总胆红素）、TCHO(Total cholesterol,总胆固醇)、TG（Triacylglycerol，甘油三酯）、TP(Total protein，总蛋白)、Cl（Chloridion氯）、Na（Naloridion钠）、K（Potassiumion钾），对各脏器进行脏器指数计算和病理学检查。　　结果：(1)小鼠急性毒性试验：少棘蜈蚣最细粉灌胃后各组小鼠中毒症状相似，在高剂量组观察到尿失禁，抽搐，痉挛等毒性反应。死亡小鼠主要脏器（肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺等）肉眼观察未见异常。观察14天后，统计各剂量组动物死亡数，采用软件计算LD50，少棘蜈蚣最细粉对小鼠的LD50为8.8218g/kg，95％置信区间为8.3800g/kg≤LD50≤9.2870g/kg。小鼠死亡情况未发现性别差异性。(2)大鼠3月慢性毒性试验：少棘蜈蚣最细粉在给药第6周后对大鼠体重增长有一定的抑制作用，恢复期逐渐恢复;给药4周，少棘蜈蚣最细粉2.0g/kg组仅有RBC（Red blood cell，红细胞计数）低于阴性对照组，而给药12周后，0.5、1.0、2.0g/kg组大鼠RBC（Red blood cell，红细胞计数）、HGB（Hemoglobin，血红蛋白测定）降低，PLT（Platelet，血小板计数）、PCT(Platelet hematocrit，血小板压积)升高，但恢复期可恢复正常;给药4周，2.0g/kg组BUN(Blood urea nitrogen，血尿素氮)、CREA（Creatinine，肌酐）高于阴性对照组，其它各血生化指标无明显变化，而给药12周，0.5、1.0、2.0g/kg组AST(Aspartate aminotransferase，谷草转氨酶)、ALT(Alanine aminotransrease，谷丙转氨酶)、CK（Creatine kinase，肌酸激酶）、BUN（Blood urea nitrogen，血尿素氮）、CREA（Creatinine，肌酐）均高于阴性对照组，恢复期有所下降，但2.0g/kg组CK（Creatine kinase，肌酸激酶）、BUN(Blood urea nitrogen，血尿素氮)、CREA（Creatinine，肌酐）仍未恢复正常;0.5g/kg组恢复期肾脏脏器指数低于阴性对照组，其余各组各脏器指数无明显变化;对各组脏器进行病理组织学切片检查，结果表明，给药第4周，检查发现2.0g/kg组1例肾脏轻度纤维化。给药第12周，检查发现①肾脏病变：2.0g/kg组1例轻度纤维化，0.5g/kg、1.0g/kg组各1例肾轻度水肿。②肝脏病变：1.0g/kg、2.0g/kg组各1例轻度水肿。③肺脏病变：2.0g/kg组1例轻度炎症。④睾丸病变：2.0g/kg组睾丸凝固性坏死1例。恢复期，①肾脏病变：1.0g/kg组1例轻度纤维化，2.0g/kg组1例轻度炎症，1例重度纤维化。②肝脏病变：1.0g/kg、2.0g/kg组轻度水肿各1例。　　结论：少棘蜈蚣最细粉对小鼠损害主要涉及呼吸系统、神经系统，小鼠LD50为8.8218g/kg(8821.8mg/kg)，95％置信区间为8.3800g/kg～9.2870g/kg，明显大于5000mg/kg，属于微毒范畴。少棘蜈蚣最细粉给药3月，对大鼠有一定溶血毒性，并有一定的毒性损害出现在肝脏、肾脏、肺、心脏和睾丸。

目录

摘要

前言

第一部分 少棘蜈蚣最细粉小鼠急性毒性研究

1 实验材料

2 实验方法

3 结果

第二部分 少棘蜈蚣最细粉大鼠3月慢性毒性研究

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

讨论

1 急性毒性试验

2 慢性毒性试验

结论

参考文献

缩略语中英文对照表

致谢

中药蜈蚣的毒性成分及毒理学研究进展 综述

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