“类风关巴布剂”穴位贴敷对CIA大鼠滑膜细胞P53、Bcl-2、NF-κB及其分泌的IL-1β、TNF-α的影响

摘要

目的： 1.观察“类风关巴布剂”治疗CIA大鼠时的发病情况、病情变化和疗效。 2.观察“类风关巴布剂”对局部穴位组、远道穴位组和系统穴位组疗效差异。 3.观察“类风关巴布剂”治疗CIA大鼠对滑膜细胞凋亡和炎症因子的影响。 方法： 1.CIA大鼠的造模：随机从100只大鼠中选出10只为正常对照，其余90只用于造模，参照文献[1]方法配制成Ⅱ型胶原乳剂。具体方法为：在无菌条件下，用0.1mol/L冰醋酸充分溶解牛Ⅱ型胶原(BcⅡ)，浓度为4mg/ml，置4℃冰箱过夜后，与弗氏完全佐剂等体积混合、振荡乳化，制成BcⅡ乳剂(即每0.5ml含1mgBcⅡ)。置4℃冰箱保存备用。注射方法：于大鼠背部及尾根分5点行皮内注射，每点0.1ml，总量0.5ml(含1mgBcⅡ型胶原)。15d后同法分两点皮内激发注射。正常对照组予以生理盐水同法注射。初次免疫25d后参照关节炎指数评分标准[2]对造模效果进行评估。 2.CIA大鼠分组给药：将模型复制成功的大鼠随机分为四组，每组10只，分别作为CIA模型组、局部穴位贴敷组(局部组)、类风关巴布剂远道穴位贴敷组(远道组)及类风关巴布剂综合穴位贴敷组(系统组)正常对照组、CIA模型组不予任何处理，局部组予以左侧足三里、犊鼻、委中穴位贴敷、远道组予以双侧肾俞穴位贴敷，综合组予双侧肾俞、双侧足三里穴位贴敷，三组给药剂量相同(给药面积与时间相同)。每1d用药1次，连续14天。 3.观察关节肿胀指数，细胞因子的检测，滑膜组织P53、Bcl-2、NF-κB的ABC染色。 结果： 1.关节肿胀指数观察[4]’给药第2周时，各组指数低于模型组，其中系统组、局部组与模型组有显著性差异。(P＜0.05)。给药第3周时，各组指数低于模型组，与模型组均有显著性差异(P＜0.05)。 2.关节滑膜组织溶浆[6]IL-1β、TNF-α定给药组与模型组相比，TNF-α水平均降低，有显著性差异(P＜0.01)。系统组、局部组、远道组与模型组相比，IL-1β水平有显著性差异(P＜0.01)。 3.P53、bcl-2、NF-κB计分[7]比较：在表4中，与模型组比较，各治疗组的P53、bcl-2、NF-κB积分差异均有显著性，P53和bcl-2积分增加，说明治疗后滑膜细胞凋亡增加，而系统组接近正常组(P＞0.05)；NF-κB积分降低，说明炎症改善，此项指标也是系统组接近正常。 结论： 1.“类风关巴布剂”穴位贴敷能够有效控制CIA大鼠关节炎的病情并诱导滑膜细胞凋亡。 2.其机制可能是综合作用的结果，如上调凋亡相关基因的表达，调节相关细胞因子和炎症介质等；合理用穴也是关键要素，一方面，通过经络腧穴给药对药效的放大作用[18]来提高疗效，另外，远近配穴可能通过标本兼治，多靶点起效，使其整体疗效优于单纯远道取穴或局部取穴。

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综述 类风湿关节炎的中西医治疗近况