甘草次酸对大鼠体内可的松和氢化可的松药物代谢动力学的影响

摘要

目的： 建立HPLC法测定大鼠血清中可的松(E)和氢化可的松(F)浓度。研究甘草次酸(GA)对可的松和氢化可的松在大鼠体内药物代谢动力学的影响，为临床合理用药提供参考。 方法： ①血清样品采用液液萃取法，用乙酸乙酯提取可的松和氢化可的松后，以乙腈-水-0.1%TFA为流动相进行梯度洗脱，流速：0.9 mL·min-1，柱温：25℃，检测波长：246nm，以吡非尼酮为内标，ZORBAX SB-C18柱分离。对血清中可的松和氢化可的松同时进行检测。 ②以24只健康雄性SD大鼠为受试对象，随机分成可的松20mg·kg-1单用组(E组)及与甘草次酸(10mg·kg-1)联用组(E+GA组)，氢化可的松20mg·kg-1单用组(F组)及与甘草次酸(10mg·kg-1)联用组(F+GA组)。E+GA组和E组分别注射可的松后5，10，20，40，60，90，120，150，180，240min取血0.8mL。F+GA组和F组分别在注射氢化可的松后5，10，20，40，60，90，120，150，180，210，240，300，360min取血0.8mL。采用高效液相色谱法检测血清中可的松及氢化可的松的浓度，并用DASver2.0软件拟合二者的药动学参数。 ③大鼠给药剂量及分组同上，将大鼠禁食12h过夜，不禁水。代谢笼收集给药后24h尿液，并对其进行浓度测定。 结果： ①血清中可的松在0.05～6.00 mg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9997)，氢化可的松在0，05～6.00 mg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9999)，定量下限均为0.05 mg·L-1。可的松和氢化可的松的方法回收率分别为98.70%～103.60%和99.00%～103.20%；提取回收率分别为79.67%～82.00%和78.18%～81.47%。日内、日间精密度的RSD均小于10％。 ②所得可的松、氢化可的松浓度经DAS2.0统计软件进行处理，可的松、氢化可的松在大鼠体内的代谢过程均属于二室模型。与E组相比，E+GA组大鼠体内可的松AUC(0-t)、AUC(0-∞)和Cmax显著增高，t1/2β显著延长(P<0.05)，CL/F显著降低(P<0.05)；E组和E+GA组可的松的代谢产物氢化可的松的药代结果表明，E+GA组AUC(0-t)、AUC(0-∞)和Cmax显著增高(P<0.05)，CL/F显著降低(P<0.05)。F组和F+GA组氢化可的松的药物代谢动力学结果表明，F+GA组AUC(0-t)、AUC(0-∞)和Cmax显著增高(P<0.05)，CL/F显著降低(P<0.05)，t1/2β增大，但差异无统计学意义。 ③E组和GA+E组给药24h后，尿中排出可的松浓度分别为(11.48±1.93)mg·L-1、(26.58±2.20)mg·L-1，E/F分别为2.37±0.71、5.42±0.28，E+GA组远高于E组(p<0.05)。连用氢化可的松和甘草次酸后，氢化可的松的浓度显著升高，从(23.24±2.24)mg·L-1变为(57.52±7.53)mg·L-1。E/F在F组和F+GA组也表现出了显著性差异(p<0.05)，F+GA组比F组下降了29.3%。 结论：体内研究表明甘草次酸和可的松、氢化可的松合用时，甘草次酸可抑制大鼠体内可的松和氢化可的松的代谢，可明显提高可的松和氢化可的松的AUC和Cmax，其机制可能与甘草次酸对11β-HSD的抑制有关。