胚胎胰组织移植器官形成的实验研究

摘要

目的：目前使用胰岛移植或胰腺移植治疗糖尿病，但供移植的胰腺来源严重短缺，因此需要进一步开拓可供移植的胰腺来源。本课题将探讨胚胎胰组织在同种异体内重新血管化并再生长发育的可能性，以及影响其发育的因素。 方法：实验采用远交系SD大鼠和近交系Lewis大鼠分别建立同种胚胰移植模型。将远交系SD大鼠妊娠15.5天(E15.5)，E16.5，E17.5和E18.5的胚胰分别移植到成年健康同种SD大鼠的肾包膜下和网膜内，移植后2～3周期间开腹观察器官形成情况，并取标本行病理切片和免疫组化检查，根据结果选择适合移植的胎龄。将Lewis大鼠妊娠14.5天(E14.5)和妊娠15.5天(E15.5)的胚胰分为2组分别移植到成年健康Lewis大鼠的肾包膜下和网膜内，移植后3周和6周分别开腹观察器官形成情况，并取标本病理切片观察，行免疫组化半定量和定位。结果：远交系SD大鼠同种移植组中，(1)E15.5胚胰植入肾包膜下3周后，发育良好，腺泡导管分化发育，β细胞增殖并聚集，轻度排斥反应。植入网膜内.2.5周后，即有中度排斥反应，发育有限。(2)E16.5胚胰移植后第2.5周，可见中度排斥反应，但结构发育较好。(3)E17.5，E18.5胚胰植入肾包膜下后，2.5周内就发生重度排斥反应，生长严重受限，β细胞未见增殖。 近交系Lewis大鼠同种移植组中，(1)胚胰移植入肾包膜下3周后，E14.5和E15.5胚胰体积均会增大约10～15倍，外分泌部分腺泡导管分化发育，β细胞大量增殖，形成胰岛，且分泌胰岛素功能正常，抗胰岛素免疫组化阳性染色的内分泌胰岛β细胞团面积分别为53605.9±15153.8um2和109024.1±31413.5um2。组织周围可见新生血管。(2)植入肾包膜下6周后，E14.5胚胰内分泌部分面积为174025.2±38702.5um2，进一步增殖(P＜0.05)，E15.5胚胰内分泌部分面积为127479.2±35117.4um2，未见增殖(P＞0.05)，外分泌部分均有纤维化表现，内分泌部分跟外分泌部分有分离趋势。(3)植入网膜内3周后，胚胰体积增大，β细胞也增殖形成胰岛，E15.5胚胰阳性染色的内分泌胰岛细胞团面积为20831.6±11480.1um2。但无论是体积增大还是β细胞的增殖都没有肾包膜下移植的胚胰显著(P＜0.05)。 结论：(1)不使用免疫抑制剂时，一定胎龄的胚胰可以在同种远交系和近交系成年大鼠体内再血管化，并发育分化为近似正常胰腺组织。此后见内分泌胰岛的选择性分化。(2)E14.5，E15.5的胚胰用来移植比较适合，排斥反应较轻，增殖潜力较大。(3)移植在肾包膜下的胚胰相对于移植在网膜内的排斥反应较轻，发育好，体积更大且β细胞数更多。

目录

前言

材料和方法

结果

附图和附表

讨论

主要参考文献

综述胚胎胰组织移植器官形成的研究进展和展望

致谢