PIP对脂肪细胞IR模型糖代谢AMPK通路相关靶点干预研究

摘要

目的: 本研究课题通过建立3T3-L1前脂肪细胞IR模型，观察PIP对该细胞模型的糖代谢紊乱的调节作用，对AMPK通路中关键因子AMPKα、上游通路的APN、LEP及下游通路的GLUT4的干预作用，以探索PIP改善糖代谢紊乱的可能机理。 方法: 1采用IBMX、DEX及INS混合物诱导3T3-L1前脂肪细胞分化成脂肪细胞，并鉴定其分化;用1μM DEX诱导脂肪细胞产生IR，检测细胞的葡萄糖消耗量;以AICAR和ROG为阳性药，观察不同浓度的PIP对糖代谢紊乱的调节作用; 2 ELISA法检测细胞上清中APN、LEP的含量;RT-PCR检测AMPKα、APN、LEP及GLUT4的mRNA表达;Western蛋白印迹检测AMPKα、p-AMPKα及GLUT4的蛋白表达。 结果: 11μM地塞米松作用脂肪细胞48h后，IR模型组细胞的葡萄糖消耗量明显低于正常对照组(P＜0.001)，IR细胞模型成功制备;与正常对照组比较，三个浓度的PIP均能显著增加IR模型细胞的葡萄糖消耗量（P＜0.01，P＜0.001），且10μM的PIP作用12h即有明显的提升葡萄糖消耗量作用(P＜0.01)。 2 ELISA法结果显示，与IR模型组比较，PIP能显著增加上清液中APN含量（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）;RT-PCR检测结果显示，与IR模型组比较，PIP能增加APN、GLUT4的mRNA表达，AMPKα无明显变化;Western蛋白印迹检测结果显示，与IR模型组比较，PIP能增加p-AMPKα及GLUT4的蛋白表达。 结论 PIP能改善IR细胞模型糖代谢紊乱可能与调节AMPK信号通路中相关因子 APN、AMPKα、GLUT4的表达有关。

目录

声明

摘要

符号与说明

引言

第一章 3T3-L1前脂肪细胞的培养和脂肪细胞IR模型的建立

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4 实验小结

第二章 PIP对脂肪细胞IR模型糖代谢紊乱的改善作用

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4 实验小结

第三章 PIP对脂肪细胞IR模型上清液中APN、LEP的影响

1 实验材料

2 实验方法

4 实验小结

3 实验结果

第四章 PIP对脂肪细胞IR模型AMPKα、APN、LEP、GLUT4 mRNA的影响

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4 实验小结

第五章 PIP对脂肪细胞IR模型AMPKα、GLUT4蛋白表达影响

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4 实验小结

讨论

结论

参考文献

文献综述 AMPK及相关因子调节胰岛素抵抗研究进展

发表论文

致谢