第一章 文献综述
1.1 飞蝗简介
1.2 谷胱甘肽-S-转移酶(GST)研究进展
1.2.1 昆虫GSTs在杀虫剂代谢解毒方面研究
1.2.2 昆虫GSTs基因参与内源物质代谢研究
1.3 芳香化合物受体(AhR)概述
1.4 杀虫剂概述
1.5 研究意义及目的
第二章 干扰飞蝗芳香化合物受体(LmAhR)基因影响飞蝗对杀虫剂的敏感性
2.1 实验材料与方法
2.1.1 试供昆虫
2.1.2 实验试剂
2.1.3 主要设备和仪器
2.1.4 飞蝗LmAhR基因的克隆
2.1.5 飞蝗LmAhR基因的生物信息学分析
2.1.6 飞蝗总RNA提取及cDNA模板制备A. 取样
2.1.7 实时荧光定量PCR检测
2.1.8 RNAi技术沉默飞蝗LmAhR基因(1) 双链基因的合成
2.1.9 沉默飞蝗LmAhR基因后对不同杀虫剂的敏感性分析
2.2 实验结果
2.2.1 飞蝗LmAhR基因的克隆
2.2.2 飞蝗AhR氨基酸序列分析
2.2.3 昆虫AHRs间的聚树分析
2.2.4 沉默飞蝗LmAhR基因后对四种杀虫剂的敏感性
2.3 讨论
第三章 飞蝗比较转录组分析
3.1 实验材料与方法
3.1.1 试供昆虫
3.1.2 相关的试剂及仪器
3.1.3 RNA测序文库制备和Illumina测序
3.1.4 转录组测序文库评估
3.1.5 测序文库数据组装
3.1.6 差异基因表达分析
3.1.7 差异基因功能注释
3.1.8 RNAi技术沉默飞蝗LmGSTd7基因
3.1.9 cDNA模板制备
3.1.10 实时荧光定量PCR 检测
3.2实验结果
3.2.1 RNAi干扰和沉默效率检测
3.2.2 样品测序数据质量评估
3.2.3 转录组文库数据组装结果
3.3.4 测序数据与组装结果的比对
3.3.5 差异基因表达分析鉴定需要AhR调控表达的基因
3.3.6 差异基因的功能注释
3.3.7 RT-q PCR分析证实AhR调控的下调基因的表达
3.3 讨论
第四章 飞蝗LmGSTd7基因对毒死蜱的敏感性机制研究
4.1 实验材料
4.1.1 试供昆虫
4.1.2 试供材料
4.1.3 相关试剂及仪器
4.2 实验方法
4.2.1 LmAhR和 LmGSTd7时期和组织的RT-qPCR
4.2.2 RNAi技术沉默飞蝗LmGSTd7基因
4.2.3 cDNA模板制备
4.2.4 沉默飞蝗LmGSTd7基因后对不同杀虫剂的敏感性分析
4.2.5 LmGSTD7酶的体外原核表达
4.2.6 LmGSTD7酶蛋白的纯化
4.3实验结果
4.3.1 LmGSTd7和LmAhR基因的表达谱分析
4.3.2沉默飞蝗LmGSTd7基因后对杀虫剂的敏感性
4.3.3 LmGSTD7的表达及纯化
4.4 讨论
全文总结
参 考 文 献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简况及联系方式
承诺书
声明