金属离子对内氏放线菌尿素酶活性的影响

摘要

目前，齿科金属和合金材料已广泛的应用于口腔修复等临床治疗中，其介入口腔环境后与口腔粘膜、牙龈组织、大量微生物直接接触会发生金属腐蚀导致金属离子及其衍生物析出，另外合金材料与组织紧密接触也容易造成金属离子的积聚。有研究认为，齿科合金的腐蚀导致金属离子的释放并引起相应的金属-蛋白、金属-细胞反应，是引起牙龈牙周组织炎症的主要原因之一。 但从生态学角度看，口腔是一个多生态体系，其中微生态系与口腔疾病密切相关。正常情况下的口腔微生物系统处于动态平衡状态，当体内外环境发生持续变化，一些潜在微生物过度增殖将破坏这种平衡，导致口腔疾病发生。龋病和牙周病就是口腔微生态失衡的表现。影响口腔微生态的因素很多，其中碳水化合物和氮源化合物代谢所致的PH值是决定牙菌斑和牙周微生态平衡的重要因素，而尿素代谢是菌斑内提供碱性物质的主要途径之一，尿素代谢产生的碱性物质可中和细菌糖代谢产生的酸，提高了PH值，有利于细菌自身和其它耐酸性较差的微生物生长，从而阻止菌斑生态向致龋菌群转化，。另一方面，龈下菌斑中尿素代谢产生的高PH值和高浓度氨被认为与龈炎的发生以及牙周组织的破坏有关。此外，尿素代谢产物氨还可以与菌斑内许多有机物结合生成氨基酸成为菌斑微生物的营养来源之一。因此，由尿素酶介导的尿素代谢在维持菌斑微生态系统的稳定性上起着十分重要的作用。尿素酶是尿素分解的必要条件，虽然它在细菌体内合成，但它的活性表达要受到外界环境因素的影响，那么齿科合金析出的金属离子是否会影响细菌尿素酶的活性呢?是否会通过影响细菌尿素酶的活性改变口腔微生态环境从而影响其致病性呢? 齿科合金析出金属离子具有选择性，镍铬合金以析出镍离子为主，铜离子和锌离子则是贵金属合金常见的析出离子。 内氏放线菌是人类口腔和龈上龈下菌斑中的常居菌，被认为和早期根面龋、牙周病有关，内氏放线菌是革兰氏阳性兼性厌养菌，具有合成尿素酶的能力，参与尿素代谢。 本实验以内氏放线菌为研究对象，体外观察齿科合金析出离子对口腔微生物尿素代谢尿素酶活性的影响。 [研究目的]研究金属离子对内氏放线菌尿素酶活性的影响。 [研究方法]用含不同浓度梯度的铜锌镍离子的BHI培养基厌氧培养内氏放线菌WVU45型菌株、测定其尿素酶活性。 [研究结果]1。内氏放线菌尿素酶的活性随着铜离子浓度(12.5～100μmol/L)的升高而降低。与对照组相比，当铜离子浓度为12.5μmol/L时，内氏放线菌尿素酶的活性降低为(0.125±0.008)ug产氨量/min/mg细菌湿重(P＜0.05)；当铜离子浓度为100μmol/L时，内氏放线菌尿素酶的活性为(0.0349±0.010)ug产氨量/min/mg细菌湿重(P＜0.01)。 2.内氏放线菌尿素酶的活性随着锌离子(0～50μmol/L)浓度的升高有下降趋势；当锌离子浓度为过100μmol/L时，尿素酶活性的降低与对照组相比有显著性差别(P＜0.05)。 3.内氏放线菌尿素酶的活性随着镍离子浓度(12.5～100μmol/L)的升高而增强。当镍离子浓度为12.5μmol/L时，内氏放线菌尿素酶的活性从(0.188±0.013)ug产氨量/min/mg细菌湿重升高为(0.511±0.012)ug产氨量/min/mg细菌湿重(P＜0.05)；当镍离子浓度为50μmol/L时，内氏放线菌尿素酶的活性升高为(1.027±0.147)ug产氨量/min/mg细菌湿重(P＜0.01)；当镍离子浓度为100μmol/L时，内氏放线菌尿素酶的活性从升高为(3.791±0.100)ug产氨量/min/mg细菌湿重(P＜0.001)。 [结论]1.镍离子(12.5～100μmol/L)浓度依赖性的增加内氏放线菌尿素酶的活性；铜离子(12.5～100μmol/L)浓度依赖性的抑制内氏放线菌尿素酶的活性；锌离子在高浓度(100μmol/L)时，可显著抑制内氏放线菌尿素酶活性。 2.与铜、锌离子相比，镍离子对内氏放线菌尿素酶的影响更显著(P＜0.001)。

目录

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述：义齿修复与口腔微生态平衡

附录：已发表的论文

致谢