中林美荷杨组织培养及农杆菌介导的耐盐基因（NHX）遗传转化的研究

摘要

本文以中林美荷杨当年生新枝、叶片和叶柄为外植体，建立了中林美荷杨的组织培养再生体系。结果表明叶柄不定芽诱导优于茎段和叶片，茎段形成层不定芽诱导效果也较好，长期水培的茎段形成层易于诱导不定芽，但无菌处理较困难。该体系的建立为其快速繁殖及遗传转化提供条件。　　本文在建立中林美荷杨组织培养体系的基础上，利用农杆菌介导法将NHX基因转入该杨树中，并对农杆菌转化的一些影响因素进行了研究。经过抗性植株的PCR检测初步证明外源基因已整合到中林美荷杨基因组中。该转化体系的建立为中林美荷杨的遗传转化研究提供了理论和技术上的借鉴。

目录

论文说明：缩略词表

摘要

第一部分文献综述第一章杨树组织培养及基因转化研究概述

1.杨树组织培养

1.1杨树组织培养一般概况

1.2影响杨树组织培养的因素

1.3组织培养在杨树上的应用

2.杨树基因工程研究

2.1遗传转化方法

2.2影响农杆菌转化效果的主要因素

2.3杨树基因工程研究近年来的应用

2.4杨树基因工程研究存在的问题

2.5展望

第一部分文献综述第二章植物耐盐机制的分子生物学研究进展

1.植物耐盐机制的分子生物学研究进展

1.1小分子渗透调节物质的积累

1.2大分子蛋白类的积累

1.3离子摄入和区域化

1.4脱落酸（ABA）

1.5胁迫反应基因的转录因子

1.6清除活性氧的膜保护体系

2.结语

第二部分实验部分第一章中林美荷杨不定芽分化与植株再生

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2.结果和分析

2.1初代培养

2.2不定芽的继代培养

2.3不定芽的壮苗、生根，炼苗、移栽

3.讨论

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第二部分实验部分第二章根癌农杆菌介导的中林美荷杨遗传转化体系的建立

1材料和方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1中林美荷杨Kan最佳筛选浓度的确定

2.2三因素三水平实验结果

2.3AS的影响

2.4延迟筛选的影响

2.5筛选培养接种方式的影响

2.6PCR检测

2.7Kan抗性芽的继代筛选培养及生根培养

3讨论

3.1卡那霉素的确定

3.2菌液浓度、浸染时间及预培养对Kan抗性芽的产生的影响

3.3AS的影响

3.4延迟筛选培养

3.5问题及分析

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结论

参考文献

致谢

个人简历

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