可控压力致兔椎间盘退变细胞增殖和衰老基因的表达及其意义

摘要

目的：检测可控压力致退变兔椎间盘细胞增殖关键基因Ki67和细胞衰老关键基因p16ink4a的表达，并观察烟酰胺对上述基因的调控作用，探讨细胞增殖和衰老在椎间盘退变中的作用。
　　 方法：①可控压力致兔椎间盘退变模型的构建。②取24只日本大白兔，动物随机分为1-4组：第1组为正常对照组：置入轴向加压装置，但不予加压；第2组为轻度退变组：采用轴向加压模型加压10kg 二周；第3组为重度退变组：采用轴向加压模型加压10kg 一个月；第4组为治疗组：10kg 加压同时予烟酰胺20mg/kg 口服二周后解除压力继续给予烟酰胺二周。③各组动物行MRI检查和HE 染色，评估椎间盘退变程度。④各组分别采用RT-PCR法和免疫组织化学法检测Ki67的表达，采用免疫组织化学法检测p16ink4a的表达。
　　 结果：①MRI 摄片显示退变组加压节断兔椎间盘信号明显减低，治疗组加压节断兔椎间盘信号较退变组信号增强。HE 染色显示退变组椎间盘出现较明显的椎间盘退变组织学表现，而治疗组椎间盘退变程度较退变组明显减轻。②RT-PCR法显示轻度退变组和重度退变组Ki67的表达较正常对照组显著降低，治疗组Ki67表达较轻度退变组和重度退变组均有明显提高。③免疫组化检测显示轻度退变组和重度退变组Ki67的表达较正常对照组均显著降低，但是轻度与重度退变组之间没有显著差异，治疗组Ki67表达较重度退变组有明显提高。轻度退变组和重度退变组p16ink4a的表达较正常对照组均显著提高，且重度退变组的表达明显高于轻度退变组，治疗组p16ink4a表达较轻度退变组没有显著性差异。
　　 结论：细胞增殖减缓和细胞衰老增速是椎间盘退变过程中的重要细胞生物学变化，而烟酰胺对退变椎间盘细胞增殖减缓有显著的逆转作用。