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【6h】

Sox9调控血管平滑肌细胞表型转化及移植物动脉硬化的作用机制研究

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英文缩略词表

前言

实验方法

1. 研究对象

2. 原代血管SMC培养和处理方法

3.1总蛋白提取

3.2 蛋白浓度测定及蛋白变性

3.3 SDS-PAGE凝胶制备

3.4 上样

3.5 电泳

3.6. 转膜

3.7. 封闭

3.8. 一抗孵育

3.9. 洗涤

3.10. 二抗孵育

3.12 显影、采集图像及数据分析

4. qRT-PCR实验步骤

4.1 RNA的抽提

4.2 RNA浓度及纯度测定

4.3 RNA逆转录

4.4 RT-PCR

4.5 数据分析

5. 免疫共沉淀(co-IP)

6. 染色免疫共沉淀(CHIP)

7. BrdU细胞增殖实验

8. Transwell细胞迁移实验

9. 基因转染动脉移植模型的建立及标本处理

9.1 建立动脉移植模型

9.2 移植动脉标本的处理

10. 组织学及形态学检测

11. 免疫组织化学

12. 组织及细胞免疫荧光实验步骤

12.1 组织免疫荧光

12.2 细胞免疫荧光

13. 统计学分析

实验结果

1. 移植动脉基因转录组测序

2. 移植损伤诱导血管SMC中Sox9的表达

3. Sox9调控血管SMC表型转化

4. Sox9竞争性抑制Myocardin与SRF的相互作用

5. Sox9促进血管SMC增殖和迁移

6. 异系移植动脉中膜SMC中Sox9的选择性敲低抑制移植动脉硬化的形成

7. p27通过负性调控Sox9的表达维持血管SMC的收缩表型

8. HMGB1诱导血管SMC自噬活化

9. 自噬促进p27泛素化降解

10. 自噬调控HMGB1诱导的血管SMC表型转化

11. Sox9介导自噬调控的血管SMC表型转化

讨论

参考文献

综述:Sox9的调控与人类发育及疾病的关联

参考文献

在校期间发表论文及所获奖励

致谢

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