HMGB1在失血性休克肠淋巴液致小鼠肺损伤中的作用

摘要

目的：高迁移率族蛋白1（high mobility group box-1 protein，HMGB1）在多种致病因素引起急性肺损伤（acute lung injury，ALI）的发展过程中具有重要作用；失血性休克后肠淋巴液（post-hemorahgic shock mesenteric lymph，PHSML）回流是失血性休克引起 ALI的一个重要发病机制，阻断PHSML回流可减轻ALI，相关机制需要进一步研究。本研究建立失血性休克小鼠模型，观察PHSML引流对失血性休克小鼠肺HMGB1、晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products，RAGE） mRNA表达与蛋白含量的影响；比较 PHSML与正常肠淋巴液（normal mesenteric lymph，NML）中HMGB1与RAGE的蛋白含量；将引流至体外的PHSML静脉输入正常小鼠，观察对肺组织HMGB1与RAGE含量的影响；明确HMGB1、RAGE在PHSML引起ALI中的作用。
　　方法：健康、雄性C57BL/6J小鼠随机均分为：假手术组、休克组、休克+引流组（n=6）。休克组、休克+引流组小鼠按我室常规方法复制失血性休克模型，维持低血压40±2 mmHg90 min后，经股动脉行液体复苏（放出的全血加等量林格氏液），30 min完成；观察至输液结束后3h。休克+引流组在输液结束后，按常规方法引流肠淋巴液至3h。假手术组行相同的手术操作，但不放血、不输液。各组小鼠在输液结束后3h或相当时间点，留取固定位置的肺组织；部分组织用于提取RNA，应用qRT-PCR方法检测HMGB1、RAGE mRNA表达；部分组织用于制备组织匀浆，应用 ELISA方法检测肺组织 HMGB1、RAGE含量。取18只健康、雄性C57BL/6J小鼠，常规方法麻醉后，引流NML，持续1h；取6只小鼠，建立失血性休克模型，留取液体复苏后0~3 h的PHSML。应用ELISA方法检测淋巴液中HMGB1、RAGE含量。将NML、PHSML分别输入正常雄性C57BL/6J小鼠以及HMGB1抑制剂甘草酸（glycyrrhizin，GL）预处理的小鼠，均n=6；3h后留取肺组织，ELISA方法检测肺组织HMGB1、RAGE含量。
　　结果：休克组小鼠肺组织HMGB1、RAGE mRNA表达及其含量均显著高于假手术组（P<0.05）；休克+肠淋巴液引流组小鼠肺组织HMGB1、RAGE mRNA表达及其含量均显著低于休克组（P<0.05）。休克肠淋巴液中HMGB1、RAGE水平与正常肠淋巴液均未见统计学差异。PHSML静脉输入增高正常小鼠肺组织HMGB1水平（P<0.05），该作用被GL处理消除（P<0.05）；各组小鼠肺组织RAGE水平的变化与HMGB1一致，但未见统计学差异（P>0.05）。
　　结论：HMGB1在PHSML休克引起肺损伤的过程中具有一定的作用，且与RAGE相关。

目录

封面

目录

中文摘要

英文摘要

英文缩写

前言

材料与方法

1 主要仪器设备

2 主要药品及试剂

3 实验动物与分组

4 失血性休克小鼠模型的建立以及肺组织标本留取

5 小鼠正常肠淋巴液留取

6 静脉输入淋巴液至正常小鼠

7 肺组织HMGB1、RAGEmRNA表达检测

8 肺组织、淋巴液HMGB1、RAGE蛋白含量检测

9 统计学处理

结果

1 肠淋巴液引流对失血性休克小鼠肺组织HMGB1 mRNA表达的作用

2 肠淋巴液引流对失血性休克小鼠肺组织RAGE mRNA表达的作用

3 肠淋巴液引流对失血性休克小鼠肺组织HMGB1、RAGE含量的作用

4 休克肠淋巴液与正常肠淋巴液HMGB1、RAGE水平的差异

5 休克肠淋巴液输入正常小鼠对肺组织HMGB1、RAGE水平的影响

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述: HMGB1在急性肺损伤发病机制中的作用

致谢

个人简历