槲皮素对实验性被动吸烟牙周炎大鼠牙周的治疗作用及肺组织的影响

摘要

目的：通过牙周结扎建立大鼠实验性牙周炎模型、密闭熏烟建立实验性被动吸烟模型；去除结扎丝建立牙周炎局部治疗模型、停止熏烟建立戒烟模型；同时配合槲皮素药物治疗；观察大鼠牙周组织和肺组织的形态、牙周组织中蛋白酪氨酸磷酸酶-2（SHP-2）的表达情况。探讨被动吸烟对实验大鼠牙周组织及肺组织炎症的影响、槲皮素对牙周炎及肺部损伤的治疗作用，为槲皮素治疗被动吸烟造成的牙周炎及肺部损伤的临床应用提供理论依据和实验参考。
　　方法：将88只6月龄雄性SD大鼠随机抽取10只，记为正常对照组（N组），剩余大鼠随机分为3组，分别记为牙周炎组（L组），被动吸烟组（P组），被动吸烟牙周炎组（LP组），L、LP组麻醉下行牙周结扎，P、LP组采用密闭熏烟的方法进行被动吸烟的干预。8周后，N组全部处死，L、P、LP组各随机抽取6只处死，取上颌骨和肺组织标本。同时L、P、LP组剩余大鼠，L、LP组麻醉下去除结扎丝，P、LP组停止熏烟。L、P、LP组分别随机分为两组：牙周治疗+槲皮素组（RL+Q组），牙周治疗+空白组（RL+S组）；戒烟+槲皮素组（SP+Q组），戒烟+空白组（SP+S组）；牙周治疗+戒烟+槲皮素组（RL+SP+Q组），牙周治疗+戒烟+空白组（RL+SP+S组），槲皮素按80mg/（kg/d）给药，正常喂养。8周后，处死各组大鼠，取上颌骨和肺组织标本。上颌骨标本和肺组织标本10％福尔马林溶液中固定48小时，上颌骨标本10%EDTA溶液中脱钙。各组标本制作HE染色切片，观察牙周组织及肺组织的形态学变化，免疫组化法检测各组牙周组织中SHP-2的表达变化，统计学分析处理。
　　结果：
　　1.正常对照组（N组）常规喂养8周后，牙周组织肉眼观：牙龈形态良好，牙面可见少量软垢，探诊无出血，龈沟底位于釉牙骨质界处；光镜下观察：牙周结缔组织下无炎细胞浸润，牙槽嵴顶形态规则。
　　2.牙周结扎，密闭熏烟8周后牙周组织观察：
　　2.1.牙周炎组（L组）肉眼观：牙龈红肿，结扎丝周围大量软垢，牙周探诊出血，可探及牙周袋；光镜下观察：结合上皮向根方增殖，牙槽嵴顶处骨吸收，牙槽骨中出现活跃的破骨细胞性骨吸收陷窝，固有牙槽骨破坏；免疫组织化学染色显示：牙周炎组大鼠牙周组织中 SHP-2的表达增加，与正常组相比，有显著统计学差异（P<0.05）。
　　2.2.被动吸烟组（P组）肉眼观：牙龈红肿，牙周探诊出血，龈沟底位于釉牙骨质界处；光镜下观察：上皮结缔组织下可见少量炎细胞浸润，牙槽嵴顶形态不规则。免疫组织化学染色显示：被动吸烟组大鼠牙周组织中SHP-2的表达增加，与正常组大鼠相比，有显著统计学差异（P<0.05）。2.3被动吸烟牙周炎组（LP组）肉眼观：牙龈红肿，结扎丝周围大量软垢，牙周探诊出血，可探及深牙周袋；光镜下观察：结合上皮向根方增殖，牙槽嵴顶处出现明显的骨吸收，牙槽骨中出现大量活跃的破骨细胞性骨吸收陷窝，固有牙槽骨破坏严重；免疫组织化学染色显示：被动吸烟牙周炎组大鼠牙周组织中 SHP-2的表达显著增加，与牙周炎组大鼠相比，有显著统计学差异（P<0.05）。
　　3.正常对照组（N组）常规喂养8周后，肺组织肉眼观：大鼠肺呈粉红色，色泽光亮，弹性较好；光镜下观察：大鼠肺间质及支气管壁未见炎细胞浸润，肺泡间隔未见毛细血管扩张充血，支气管黏膜纤毛排列有序。
　　4.牙周结扎，密闭熏烟8周后肺织观察：
　　4.1.牙周炎组（L组）肉眼观：形态与正常对照组基本相同；光镜下观察：大鼠肺间质及支气管壁未见炎细胞浸润，肺泡间隔偶可见毛细血管扩张充血，支气管黏膜纤毛排列有序。
　　4.2.被动吸烟组（P组）肉眼观：大鼠肺局部呈棕黑色，色泽暗淡，弹性较差；光镜下观察：大鼠肺间质及支气管壁局部出现大量炎细胞聚集，肺泡间隔中毛细血管扩张充血，支气管黏膜纤毛减少或消失。
　　4.3.被动吸烟牙周炎组（LP组）肉眼观：大鼠肺局部呈棕黑色，色泽暗淡，弹性较差；光镜下观察：大鼠肺间质及支气管壁局部出现较大量炎细胞聚集，肺泡间隔中毛细血管扩张充血严重，支气管黏膜纤毛减少或消失。
　　5.去除结扎丝，停止熏烟，同时配合槲皮素药物治疗8周后牙周组织观察：
　　5.1.牙周治疗+槲皮素组（RL+Q组）肉眼观：牙龈乳头略红肿，牙周袋深度变浅；光镜下观察：牙周结缔组织内可见少量炎症细胞浸润，牙周袋与牙槽骨之间可见大量新生的纤维结缔组织，牙槽骨吸收处可见较多的成骨细胞；免疫组织化学染色显示：牙周治疗+槲皮素组（RL+Q组）大鼠牙周组织中SHP-2的表达显著降低，与牙周治疗+空白组（RL+S组）大鼠相比，有显著统计学差异（P<0.05）。
　　5.2.戒烟+槲皮素组（SP+Q组）肉眼观：牙龈颜色形态基本正常，龈沟底位于釉牙骨质界处；光镜下观察：牙周结缔组织内几乎未见炎细胞浸润，牙槽嵴顶形态基本正常；免疫组织化学染色显示：戒烟+槲皮素组（SP+Q组）大鼠牙周组织中SHP-2的表达显著降低，与戒烟+空白组（SP+S组）大鼠相比，有显著统计学差异（P<0.05）。
　　5.3.牙周治疗+戒烟+槲皮素组（RL+SP+Q组）肉眼观：牙龈乳头略红肿，牙周袋深度变浅；光镜下观察：沟内上皮及结合上皮下方可见少量炎细胞浸润，牙周袋与牙槽骨之间可见大量新生的纤维结缔组织，牙槽骨吸收处可见较多的成骨细胞；免疫组织化学染色显示：牙周治疗+戒烟+槲皮素组（RL+SP+Q组）大鼠牙周组织中SHP-2的表达显著降低，与牙周治疗+戒烟+空白组（RL+SP+S组）大鼠相比，有显著统计学差异（P<0.05）。5.4牙周治疗+空白组（RL+S组）、戒烟+空白组（SP+S组）和牙周治疗+戒烟+空白组（RL+SP+S组）牙周状况均未见明显改善；免疫组织化学染色显示：牙周治疗+空白组（RL+S组）与牙周炎组（L组）、戒烟+空白组（SP+S组）与被动吸烟组（P组）、牙周治疗+戒烟+空白组（RL+SP+S组）与被动吸烟牙周炎组（LP组）相比，大鼠牙周组织中SHP-2的表达均无明显统计学差异（P>0.05）。
　　6.去除结扎丝，停止熏烟，同时配合槲皮素药物治疗8周后，肺组织观察：
　　6.1.牙周治疗+槲皮素组（RL+Q组）肉眼观：形态与正常对照组基本相同；光镜下观察：大鼠肺间质及支气管壁未见炎细胞浸润，肺泡间隔基本无毛细血管扩张充血，支气管黏膜纤毛排列有序。
　　6.2.戒烟+槲皮素组（SP+Q组）肉眼观：大鼠肺色泽光亮，弹性增加；光镜下观察：肺间质及肺支气管壁中可见较少量炎细胞浸润，肺泡间隔局部偶可见毛细血管扩张充血。
　　6.3.牙周治疗+戒烟+槲皮素组（RL+SP+Q组）肉眼观：大鼠肺色泽光亮，弹性增加；光镜下观察：肺间质及肺支气管壁中可见少量炎细胞浸润，肺泡间隔局部可见毛细血管扩张充血。
　　6.4.牙周治疗+空白组（RL+S组）、戒烟+空白组（SP+S组）和牙周治疗+戒烟+空白组（RL+SP+S组）肺部状况均未见明显改善。
　　结论：
　　1.正畸结扎丝结扎大鼠上颌第一磨牙，高糖食物喂养成功建立实验性牙周炎动物模型。
　　2.采用密闭熏烟的方法成功建立实验性被动吸烟大鼠模型。
　　3.被动吸烟可引起并加重牙周组织的炎症性改变。
　　4.被动吸烟可引起肺组织损伤。
　　5.槲皮素对被动吸烟造成的牙周炎和肺部损伤具有治疗作用。

目录

声明

英文缩写

前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

结果

附图

附表

讨论

1 实验性牙周炎动物模型的建立

2 被动吸烟对牙周组织及肺组织的影响

3 槲皮素对牙周组织及肺组织的治疗作用

结论

参考文献

综述:SHP-2与牙周炎关系的研究进展

致谢

个人简历