声明
中英文缩略词表(Abbreviation)
1 前言
1.1男性不育概述
1.2 精子的发生
1.2.1 睾丸的结构与功能
1.2.2 精子的发生过程
1.3. 精子发生的调控
1.3.1 精子发生的激素调控
1.3.2 精子发生的细胞调控
1.3.3 精子发生的基因调控
2 材料与试剂
2.1材料
2.1.1病例选择
2.2.2 实验动物及细胞株
2.2.1主要仪器
2.2.2主要试剂和溶液配制
3 研究方法
3.1 检测非梗阻性无精症患者CD82的表达情况
3.1.1 睾丸标本的获取
3.1.2 标本HE染色
3.1.3 免疫组织化学法观察 CD82 在梗阻性无精子症和非梗阻性无精子症患者睾丸组织中的表达
3.1.4 Western blot检测梗阻性和非梗阻性无精子症患者睾丸组织中CD82蛋白的表达
3.2 建立高表达CD82 的C57小鼠睾丸模型
3.2.1动物饲养
3.2.2病毒制备
3.2.3 腺相关病毒感染小鼠睾丸组织及效率验证
3.3 CD82过表达后影响精子发生过程的分子机制研究
3.3.1 HE染色观察的睾丸组织生精细胞变化情况
3.3.2 转录组测序
3.3.3 QRT-PCR验证
3.4统计学分析
4 结果
4.1 梗阻性和非梗阻性无精症患者睾丸组织HE染色结果
4.2免疫组化法观察非梗阻性无精症患者和对照组的睾丸组织内CD 82表达情况
4.3 Western blot法定量检测梗阻性和非梗阻性无精子症患者睾丸组织中CD82蛋白的表达
4.3 观察病毒感染效率
4.4小鼠睾丸CD 82高表达组与对照组HE染色结果
4.5 高通量转录组检测实验组与对照组差异表达基因
4.5.1实验组与对照组差异表达基因火山图及MA图
4.5.2差异表达基因GO分类
4.5.3 差异表达基因KEGG通路富集分析
4.5.4差异表达基因主要参与的分子生物学过程
4.6 实时荧光定量PCR验证高通量转录组测序结果
5讨论
6 结论
参考文献
附录
致谢
综述:micro-RNA 在精子发生及男性不育中的研究进展
