狐源兔脑炎微孢子虫分离鉴定及极管蛋白基因遗传变异分析

目录

声明

前言

第一章 文献综述

1.1兔脑炎微孢子虫的病原学特征

1.2 兔脑炎微孢子虫的分子生物学特征

1.3狐狸感染的临床症状及病理变化

1.4兔脑炎微孢子虫的的流行情况

1.5兔脑炎微孢子虫的检测

1.6防治措施

1.7 本研究的目的与意义

第二章 蓝狐脑炎微孢子虫病诊断与实验室鉴定

2.1 材料

2.1.1 病料的收集与处理

2.1.2 主要试剂

2.1.3 相关实验试剂的配制裂解液配制：

2.1.4 主要仪器梯度PCR仪

2.2方法

2.2.1 临床症状观察及病理剖检

2.2.2 病理切片的制备

2.2.3蓝狐组织DNA的提取

2.2.4引物的设计与合成

2.2.5基因的扩增PCR扩增体系：

2.2.6 PCR产物回收

2.3 结果

2.3.1 蓝狐脑炎微孢子虫病的诊断

2.3.2 蓝狐脑炎微孢子虫病的PCR检测

2.3.3 基因序列分析

2.4 讨论

2.5 小结

第三章 蓝狐源兔脑炎微孢子虫的纯化与分离

3.1 材料

3.1.1微孢子虫病料

3.1.2 细胞

3.1.3 主要试剂及配制

3.1.4 主要仪器

3.2 方法

3.2.1 微孢子虫的差速离心纯化

3.2.2 微孢子虫的染色观察

3.2.3微孢子虫的体外培养

3.2.4 微孢子虫的电镜观察

3.3结果

3.3.1微孢子虫的初步纯化效果

3.3.2 微孢子虫的Percoll分离液纯化效果

3.3.3兔脑炎微孢子虫分离与MDCK细胞病变结果

3.3.4 微孢子虫的电镜观察结果

3.4讨论

3.5小结

第四章 E.cuniculi JL株PTP1、PTP2和PTP4基因变异分析

4.1 材料

4.1.1微孢子虫

4.1.2 细胞

4.1.3 主要试剂及配制

4.1.4 主要仪器

4.2 方法

4.2.1兔脑炎微孢子虫DNA提取

4.2.2 引物的设计与合成

4.2.3极管蛋白基因的扩增：

4.2.4 PCR产物回收

4.2.5 PTP1、PTP2和PTP4与T载体连接与转化

4.3结果

4.3.1 PTP1、PTP2及PTP4基因的扩增结果

4.3.2 克隆重组质粒pMD19-T-PTP1、pMD19T-PTP2及pMD18-T-PTP4的鉴定

4.3.3 JL分离株PTP1基因序列分析结果

4.3.4 JL分离株PTP2基因序列分析结果

4.3.9 JL分离株PTP4基因序列分析结果

4.4 讨 论

4.5 小 结

结论

参考文献

作者简介

致谢