针刺对大鼠脑缺血再灌注后线粒体损伤相关因素影响的研究

摘要

脑缺血属于中医学中的中风病范畴.针刺治疗中风在中国已有数千年的临床验证,早在《黄帝内经》、《甲乙经》及《针灸大全》中即有记载.由于时间治疗窗的提出,针刺疗法已经从对缺血性中风后遗症和恢复期的治疗转到了对其急性期的治疗研究;针刺治疗脑缺血再灌注损伤是通过多途径、多因素综合作用的结果.针刺对脑缺血再灌注损伤的保护作用研究涉及面较广,从对大鼠神经功能行为缺损的干预到脑组织的病理形态学的改变,从脑功能代谢和脑微循环的改善到缺血性神经元凋亡信号转导的影响等方面都有所及.对针刺机理的研究多见于器官和系统水平的整体分析,在微观水平层面上开展对针刺效应的研究较少见.针灸的脑保护作用机制还未十分明确,很可能是通过激发机体的潜能,启动包括内源性抗缺血损伤的能力在内的多种调控机制,共同发挥抗损伤的脑保护作用.这种脑保护作用也可能促进了内源性神经干细胞参与病损的修复.该研究利用线拴法闭塞大鼠大脑中动脉造成局灶性脑缺血再灌注模型和在体外培养海马神经元模拟脑缺血再灌注损伤模型,进行了下列主要研究工作:①从脑损伤后起关键作用的线粒体改变入手,用激光共聚焦显微镜分别观察线粒体膜电势变化、细胞内钙变化,以及与用硫代巴比妥酸法、二硫对硝基苯甲酸法技术其密切相关的能说明体内自由基产生和清除状况的脑组织中MDA、GSH动态变化.②从与抗脑损伤有相应关系的神经再生营养角度,用免疫组化和放免技术,观察局灶性脑缺血再灌注损伤后神经生长相关肽(GAP-43)表达和血清转化生长因子(TGF-β)含量变化和二者相关关系.③电针曲池、足三里、百会穴对脑组织中MDA、GSH动态变化的影响.电针对GAP-4 3表达和TGF-β含量变化的影响.④观察针刺血清对线粒体膜电势及细胞内钙的变化的影响.总之,脑缺血再灌注损伤后,机体存在细胞凋亡和主动性细胞存活再生两种平行的级联过程,针刺可以干预这两种相反的过程,不仅可以抑制自由基生成、整合内源性抗氧化系统,改善Ca<'2+>失衡的状态,减轻线粒体损伤,而且可以促进缺血后的神经修复再生.

目录

缩略词表

综述一 线粒体与脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡

参考文献

综述二 脑缺血再灌注损伤与神经元再生

参考文献

综述三 针刺对脑缺血再灌注损伤的干预作用机理研究

参考文献

实验研究

前言

实验一 脑缺血再灌注后行为学变化及针刺的影响

实验二 脑缺血再灌注损伤后MDA和GSH动态变化及针刺的影响

实验三 脑缺血再灌注损伤后GAP-43和TGF-β表达及针刺的影响

实验四 脑缺血再灌注损伤后海马神经元Ca2+和线粒体膜电势变化及针刺的影响

参考文献

结语

附图

致谢

个人简历