四川省小麦赤霉病菌对多菌灵抗药性研究

摘要

小麦赤霉病是一种世界性病害，也是我国和四川省小麦生产中的三大病害之一。在我国的江浙地区，小麦赤霉病菌已经对多菌灵等苯并咪唑类杀菌剂产生了严重的抗药性。为了解四川省小麦赤霉病菌对多菌灵的抗药性情况，为四川省小麦赤霉病的药剂防治及抗药性治理提供一定的依据，我们于2002年～2006年在四川省的16个地区的30个市县采集和征集小麦赤霉病的病穗样本，经组织分离和单孢分离获得239个禾谷镰刀菌菌株，对它们进行了敏感性基线和抗药性水平测定、交互抗药性测定，通过在室内诱导出抗药突变菌株并进行了可溶性蛋白和酯酶同工酶的电泳分析，从而明确了四川省小麦赤霉病菌对多菌灵的抗药性情况，其结果如下： 1.以1.4μg/ml多菌灵为鉴别剂量，对239个禾谷镰刀菌进行了抗药性测定，共检测出了39个抗药性菌株，占总菌株的16.32％，从四川省的成都、雅安、内江、眉山、资阳和德阳6个地区检测出了对多菌灵具有抗性的禾谷镰刀菌菌株。用菌落直径法测定了多菌灵对100个敏感菌株和39个抗药性菌株的EC<,50>值，分别为O.5870±0.0139μg／ml和0.6431±0.0362μg/ml。抗药性菌株和敏感菌株的EC<,50>值相差不大，对多菌灵的抗药性表现为低抗水平。 2.测定了对多菌灵具有抗性的禾谷镰刀菌菌株对苯并咪唑类其它杀菌剂的交互抗药性，结果表明噻菌灵对测定的抗药菌株的EC<,50>值为0.98190μg/ml～1.2100μg/ml之间，较参比的敏感菌株高出2～3倍；甲基托布津对抗药菌株的EC<,50>值分布在3.32859μg/ml～4.25180μg/ml之间，是敏感菌株(2.41578μg/ml)的1.4～1.8倍。所有测定的对多菌灵具有抗性的菌株对苯并咪唑类其它杀菌剂均表现出正交互抗药性。 3.在室内以多菌灵作为突变剂，采用药剂驯化法共得到了12个对多菌灵具有不同抗性水平的突变体菌株。该结果说明在多菌灵的作用下，禾谷镰刀菌可以通过突变来产生抗药性，但这种突变的程度具有不确定性。 4.对多菌灵具有不同抗性水平的禾谷镰刀菌的可溶性蛋白和酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示，对多菌灵具有低抗水平的禾谷镰刀菌，在可溶性蛋白和酯酶同工酶谱上与亲本敏感菌株之间不存在明显的差异，没有发现可能与抗药性有关的蛋白条带或酶带。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

材料与方法

1菌种的分离和纯化

1.1材料

1.2病原菌的分离和纯化

2抗药性菌株的筛选

2.1供试菌株

2.2供试药剂

2.3筛选方法

3小麦赤霉病菌对多菌灵抗药性水平测定

3.1菌落直径法

3.2孢子萌发法

3.3活体麦穗测定法

4交互抗药性的测定

4.1供试药剂

4.2测定方法

5室内抗药性菌株的诱导

5.1供试菌株

5.2方法

6不同水平抗药性菌株酯酶同工酶及可溶性蛋白电泳测定

6.1供试菌株

6.2菌体培养

6.3样品制备

6.4菌体酯酶同工酶聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳

6.5菌体可溶性蛋白聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳

结果与分析

1田间小麦赤霉病菌对多菌灵的抗性频率

1.1四川省小麦赤霉病菌对多菌灵的抗性频率

1.2雅安地区小麦赤霉病菌对多菌灵的抗药性频率

2四川省小麦赤霉病对多菌灵的敏感基线和抗药性水平

2.1小麦赤霉病菌对多菌灵的敏感基线

2.2抗药菌株对多菌灵的抗药性水平

2.3其它镰刀菌对多菌灵的敏感性

3交互抗药性的测定

4多菌灵对分生孢子萌发的影响

5多菌灵对小麦的保护作用和杀菌作用

6室内抗药突变体的筛选

7不同水平抗药菌株酯酶同工酶及可溶性蛋白电泳分析

7.1酯酶同工酶电泳分析

7.2可溶性蛋白电泳分析

结论与讨论

1四川省小麦赤霉病菌对多菌灵的抗药性

2室内抗药突变体的筛选

3不同抗药性水平菌株酯酶同工酶及可溶性蛋白电泳分析

参考文献

致 谢

攻读硕士研究生期间发表文章情况