猪源益生乳酸杆菌的筛选及在断奶仔猪生产中的应用

摘要

用MRS平板从健康仔猪消化道不同部位(胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠)分离纯化出231株菌，耐酸试验快速筛选出26株耐酸性好的菌株。传统的碳水化合物发酵方法鉴定这26株乳酸杆菌属于：罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)6株、食淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)7株、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)1株、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)3株、植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)9株，而根据16S rRNA基因测序结果鉴定为：罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)10株、约氏乳杆菌(Lactobacillus.johnsonii)15株、类肠膜魏斯氏菌(Weissella paremesenteroides)1株。26株乳杆菌中有6株菌(ZB3、WN8、WN1、SNQ5、SBZ5、JJB3)对致病性大肠杆菌08和沙门氏菌339都有很好的抑制作用，抑菌圈大于18 mm，起主要抑菌效果的是代谢产生的有机酸。6株乳杆菌能耐受0.3-0.9％的胆盐和50℃的温度。筛选出抗逆性和抗菌性都很优良的两株菌：SBZ5和JJB3。用利福平MRS平板将这两株菌驯化成耐利福平变种，应用于断奶仔猪饲喂试验。 选取28日龄断奶仔猪共72头，随机分成3组，每组3个重复。对照组饲喂基础日粮；一组添加乳酸杆菌JJB3<'-R>；一组添加乳杆菌SBZ5<'-R>，添加量1.5×10<'9>CFU/kg饲料，饲喂21 d。与对照组相比，乳杆菌JJB3<'-R>组显著提高平均日增重达34.93％，SBZ5<'-R>组提高日增重达21.71％，说明乳酸杆菌JJB3<'-R>和SBZ5<'-R>促进断奶仔猪的生长；JJB3<'-R>组显著提高平均日采食量达28.98％，SBZ5<'-R>组提高平均日采食量达15.72％：JJB3<'-R>组极显著提高饲料转化率，SBZ5<'-R>组显著提高饲料转化率。乳酸杆菌JJB3<'-R>和SBZ5<'-R>明显降低断奶仔猪的腹泻率。乳酸杆菌JJB3<'-R>和SBZ5<'-R>组粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌的数量增加，大肠杆菌的数量减少。通过检测粪便中耐利福平乳杆菌的数量来监测饲喂的乳酸杆菌通过消化道后的存活情况：SBZ5<'-R>组的粪便中检测到的耐利福平乳杆菌占总乳杆菌的2.57％-45.47％；JJIB<'-R>组的粪便中的耐利福平乳杆菌占总乳杆菌的12.71％-35.29％。 约氏乳酸杆菌JJB3和SBZ5具有良好的抗逆性和抗菌性能，它们能促进仔猪生长，提高同增重，控制腹泻。约氏乳酸杆菌JJB3的应用效果优于SBZ5，这两株菌可作为益生乳酸杆菌应用于断奶仔猪生产。

目录

文摘

英文文摘

声明

1文献综述

1.1益生性乳酸杆菌的研究概况

1.1.1益生乳酸杆菌的作用机理

1.1.2益生乳酸杆菌的生理功能

1.2动物微生态营养的研究进展

1.2.1动物微生态营养理论

1.2.2动物微生态营养的特性

1.2.3动物微生态营养的应用

1.3本试验的目的和意义

2材料和方法

2.1试验材料

2.1.1试验动物

2.1.2试验用菌株

2.1.3培养基

2.1.4试剂

2.1.5主要仪器和设备

2.2试验方法

2.2.1乳酸杆菌的分离纯化和命名

2.2.2乳酸杆菌的初步筛选

2.2.3乳杆菌种属的鉴定

2.2.4益生乳酸杆菌的筛选

2.2.5耐利福平菌株的驯化

2.2.6乳酸杆菌的安全性试验

2.2.7动物试验

3试验结果及分析

3.1乳酸杆菌的分离纯化和命名

3.2乳酸杆菌的初步筛选

3.3乳酸杆菌的种属鉴定

3.3.1属的鉴定

3.3.2种的鉴定

3.4益生乳酸杆菌的筛选

3.4.1抑菌试验

3.4.2耐猪胆盐试验

3.4.3乳酸杆菌对热的耐受试验

3.4.4生长试验和产酸试验

3.5耐利福平变种的驯化

3.6安全试验

3.7动物试验

3.7.1乳酸杆菌对断奶仔猪生产性能的影响

3.7.2腹泻指数测定

3.7.3肠道菌群变化

4讨论

4.1乳酸杆菌的分离纯化及初步筛选

4.2乳酸杆菌的种属鉴定

4.3益生乳酸杆菌的筛选

4.3.1益生乳酸杆菌的抗菌作用

4.3.2乳酸杆菌的抗逆性

4.3.3生长试验和产酸试验

4.4动物试验

5结论

参考文献

致谢

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