牙鲆胚胎及仔鱼变态发育中Pitx2基因的组织学定位

摘要

牙鲆作为一种重要的海水经济鱼类，有着与其他海水鱼类不同的发育过程，主要是在其早期的生活史中有一从仔鱼向稚鱼转变的变态发育现象，经过变态其右眼最终迁移到身体的左侧，而使两只眼睛位于身体的同一侧。伴随右眼的移位，仔鱼在形态结构、生理生化和行为方式等方面都发生了变化。但是，如果眼睛迁移失败或逆转，都将给牙鲆苗种培育造成极大的不利。因此，研究牙鲆变态过程中右眼移位的不对称发育现象，无论是对牙鲆变态机理的理论阐述还是对牙鲆苗种培育的生产实际，都将具有重大的意义。 为此本论文以前人在前人研究的成果为基础，以牙鲆的胚胎及仔鱼为研究对象，运用原位杂交技术进一步从组织学角度研究Pitx2基因在胚胎及仔鱼中的表达定位。 论文一部分是以牙鲆胚胎及早期仔鱼为研究材料，运用整体原位杂交方法研究Pitx2基因在胚胎发育的不同时期及变态前的仔鱼中的表达定位。实验结果发现：Pitx2基因在胚胎中有表达，且表达的区域为胚胎的中胚层，中胚层最终会形成仔鱼的内脏器官；对变态前的仔鱼，可以在仔鱼身体的头部、内脏器官区域发现有Pitx2基因表达，且在内脏器官区域的表达明显高于头部区域，在内脏器官中的表达很强，同时，还可以发现随着仔鱼的发育变大，表达的区域由仔鱼的内脏器官表达占优势而转向在头部表达占优，头部的表达明显在增强。对于变态前不同时期的仔鱼，Pitx2基因在头部表达的范围也有所差异，在前期，只在头部的眼睛周围表达，而到了后期，却过多的表达在眼睛的后缘区域。另一部分是以变态期间的牙鲆仔鱼为研究对象，研究仔鱼右眼移位阶段Pitx2基因的表达，结果发现：Pitx2基因在仔鱼右眼移位的不同阶段都有表达，且表达的区域主要在眼睛周围的肌肉和结缔组织中，其次是仔鱼的内脏组织如肠以及身体其它组织；随着右眼的移位，在头部不同组织表达的丰度也在发生变化，越到后期在眼睛周围组织表达的范围越小，内脏器官的表达也呈现相同的趋势。除此，在第二部分，还研究了Pitx2基因在牙鲆成鱼各组织的表达定位，结果发现到了成鱼阶段，在成鱼的不同组织如肝脏、肌肉等中都没有发现有该基因的表达。本次实验的结果为进一步研究牙鲆仔鱼的变态提供了很好的参考资料，为最终阐释牙鲆右眼移位的分子机理提供了很好的理论依据。

目录

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摘要

前言

第一章 整体原位杂交技术研究Pitx2在牙鲆胚胎及早期仔鱼中的表达定位

第二章 组织原位杂交技术研究Pitx2在牙鲆仔鱼右眼移位阶段的表达定位

结语

参考文献

附录1综述原位杂交技术及其在鱼类基因定位中的应用

附录2发表文章

致谢