PGPR-A2制剂的制备及其对小麦抗旱性的影响

摘要

菌株PGPR-A2是从保护性耕作农田小麦根际土壤中分离、筛选出的一株具有较强生防作用的菌株。根据PGPR-A2环境适应性强、生长繁殖迅速、抗逆能力强和具有广普抗菌活性等有利于生防菌剂的生产、剂型加工，防病效果好等特点本实验对其活菌制剂开发利用进行了初步的研究，并进一步研究了PGPR-A2菌对小麦抗旱性的影响。主要结论如下： (1)PGPR-A2菌最佳芽孢产量培养基的确定。总结碳、氮、无机盐对芽孢产量的影响，芽孢形成的最适培养基组成为(g/L)：葡萄糖10，大豆饼粉10，NaCl5。 (2)PGPR-A2菌剂最佳载体的确定。载体的种类对PGPR-A2活菌粉剂的货架期、温室防效、悬浮状况均有一定的影响。在贮藏5个月后，白碳黑、膨润土、硅藻土为载体的PGPR-A2菌剂活菌存活率分别为56.08％、41.57％、38.22％；温室防效分别为71.78、69.76、67.75。三种载体制作的粉剂悬浮状况为，白碳黑-优、硅藻土-良、膨润土-劣。综合以上因素，白碳黑为PGPR-A2菌最佳载体。 (3)PGPR-A2菌剂最佳贮藏因子的确定。PGPR-A2细菌粉剂与芽孢粉剂，PGPR-A2细菌水剂与芽孢水剂的货架期对比结果如下：5个月后，硅藻土、白碳黑、膨润土3种不同载体制成的芽孢粉剂PGPR-A2菌存活率分别为82.74％、90.27％、85.00％，均高于细菌粉剂的存活率38.22％、56.08％、41.57％。芽孢水剂与细菌水剂的活菌存活率分别为94.33％、73.71％。可见芽孢菌剂为最理想的贮藏方式。 (4)PGPR-A2浸种处理对小麦抗旱性的影响。为了了解PGPR-A2对小麦抗旱性的影响，通过室内发芽实验，应用“胚芽鞘长度法”以PEG-6000四个浓度处理(0、4％、8％、12％)，对发酵全液、发酵清液、菌悬液等3种PGPR-A2菌不同产物浸种处理的的小麦进行了萌芽期抗旱性影响的初步研究。结果显示：在相同的干旱胁迫下，不同浸种处理小麦出芽率降低的程度不同，PGPR-A2菌体与其代谢产物浸种的小麦受干旱胁迫影响小，出芽率高；无菌水对照浸种的小麦受到的干旱胁迫影响大，出芽率低。在同一程度干旱胁迫下，PGPR-A2浸种处理的小麦抗旱指数和抗旱系数均显著高于无菌水对照。可以看出PGPR-A2菌不同程度缓解干旱胁迫对小麦萌发和苗期生长的影响，促进植物生长。 (5)PGPR-A2浸种处理对小麦叶片渗透调节物质的影响。随着干旱胁迫程度的加剧，被PGPR-A2菌菌体或其代谢物浸种处理的小麦叶片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸的含量均呈显著高于无菌水对照趋势，这说明，在干旱胁迫下，PGPR-A2菌菌体或其代谢物促使小麦叶片积累更多可溶性糖、脯氨酸和可溶性蛋白来提高细胞的渗透调节能力。

目录

文摘

英文文摘

声明

1引言

1.1微生物制剂

1.2 PGPR制剂的研究现状与发展趋

1.2.1 PGPR的生防作用机制

1.2.2 PGPR制剂研发现状与发展趋势

1.3关于PGPR-A2的研究进展

1.4本研究的目的与意义

1.5技术路线

2 PGPR-A2制剂的制备

2.1研究材料和试验仪器

2.1.1供试材料

2.1.2培养基

2.1.3试剂

2.1.4仪器

2.2方法

2.2.1菌株的发酵培养与测定

2.2.2菌株的发酵各种营养因子和培养条件的设计

2.2.3活菌粉剂的制备

2.2.4活菌水剂的制备

2.2.5活菌菌剂货架期的检测

2.2.6活菌菌剂防治效果的检测

2.3结果与分析

2.3.1 PGPR-A2活菌粉剂制作流程的确定

2.3.2高芽孢产量培养基的筛选

2.3.3 PGPR-A2活菌粉剂载体及分散剂的筛选

2.3.4 PGPR-A2菌剂货架期的测定

2.3.5 PGPR-A2菌剂温室药效测定

2.4讨论

2.4.1 PGPR-A2的发酵生产

2.4.2 PGPR-A2菌剂载体的选择

3 PGPR-A2对小麦抗旱性的影响

3.1研究材料和试验仪器

3.1.1供试材料

3.1.2供试仪器

3.1.3试剂

3.2试验方法

3.2.1胚芽鞘长度法

3.2.2脯氨酸含量的测定

3.2.3可溶性糖含量测定

3.2.4可溶性蛋白含量测定

3.3结果与分析

3.3.1不同PEG浓度下不同浸种处理小麦种子发芽率、发芽势的影响

3.3.2不同PEG浓度下不同浸种处理小麦种子萌发抗旱指数的影响

3.3.3不同PEG浓度下不同浸种处理小麦胚芽鞘抗旱系数的影响

3.3.4不同PEG浓度下不同浸种处理对小麦叶片脯氨酸含量的影响

3.3.5不同PEG浓度下不同浸种处理对小麦叶片可溶性糖含量的影响

3.3.6不同PEG浓度下不同浸种处理对小麦叶片可溶性蛋白含量的影响

3.4讨论

4结论

参考文献

致谢