牛卵丘卵母细胞复合体形态与其发育能力及凋亡的相关性研究

摘要

本研究依据卵母细胞胞质均质程度及颗粒细胞层数的多少，将未成熟的卵丘卵母细胞复合体分为四类：第Ⅰ类，胞质中清晰可见凝胶样黑斑且颗粒细胞层数较多；第Ⅱ类，胞质均匀，颗粒细胞层数较多；第Ⅲ类，胞质中清晰可见凝胶样黑斑且颗粒细胞层数较少；第Ⅳ类，胞质均匀，颗粒细胞层数较少。通过地衣红染色核型分析技术观察了四类卵丘-卵母细胞复合体中的卵母细胞核成熟情况，通过体外受精技术对四类卵丘-卵母细胞复合体的发育能力进行评价。本研究还利用细胞凋亡TUNEL染色技术结合激光共聚焦扫描系统研究了四类卵丘-卵母细胞复合体中卵母细胞的凋亡情况与其发育能力的相关性。研究结果如下： 1、四类卵丘一卵母细胞复合体成熟22小时后MⅡ期比率分别为71.30％、39.00％、78.10％和64.82％；卵裂率分别为72.64％、47.88％、87.30％和79.25％；8细胞发育率分别为57.18％、19.91％、68.48％和49.87％；囊胚发育率分别为32.30％、10.80％、47.56％和31.36％；囊胚孵化率分别为9.10％、2.27％、26.71％和8.90％。其中，第Ⅱ类卵丘-卵母细胞复合体的MⅡ期比率、卵裂率、8细胞发育率、囊胚发育率、囊胚孵化率都为最低，除囊胚孵化率外，都极显著低于其它三类(P(0.01)。第Ⅲ类卵丘-卵母细胞复合体的MⅡ期比率、卵裂率、8细胞发育率、囊胚发育率、囊胚孵化率都为最高，尤其是在孵化囊胚率极显著高于其它三类(P(0.01)。研究表明，牛卵丘-卵母细胞复合体的形态与其发育能力相关。 2，应用脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP末端缺口标记法(TUNEL)对未成熟、成熟22小时、成熟72小时的四类卵母细胞进行了凋亡率的检测，结果表明，未成熟的四类卵母细胞及成熟22小时的四类卵母细胞中都没有发现凋亡的卵母细胞，但在成熟72小时的四类卵母细胞中都有大量的凋亡发生。研究表明，未成熟和成熟22小时卵母细胞的发育能力与卵母细胞的凋亡不相关，随着成熟培养时间的延长，卵母细胞的凋亡率会增加。

目录

论文说明：缩略词

声明

引言

第一章 牛卵丘-卵母细胞复合体的形态与胚胎发育潜能相关性研究

前言

1材料

2方法

3结果

4讨论

参考文献

第二章牛卵丘-卵母细胞复合体形态与卵母细胞凋亡的相关性研究

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献：

结论

图版说明

文献综述：哺乳动物牛卵丘-卵母细胞复合体形态与其卵母细胞发育能力及卵泡细胞调亡的相关性研究

前言

一卵丘卵母细胞复合体的形成及人们对其形态的选择标准

二卵泡闭锁与卵泡细胞凋亡的相关性研究

三应用前景

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文