FK506/PDTC对大鼠同种异体胰十二指肠移植后急性排斥反应的作用

摘要

第一部分大鼠胰十二指肠移植模型的建立 目的：建立合理的糖尿病大鼠模型和糖尿病大鼠胰腺移植模型。 方法：用四氧嘧啶诱导建立糖尿病大鼠模型，并以此为受体运用显微外科器械和技术行大鼠胰十二指肠移植术。检测术前、术后血糖和胰岛素的变化，判断胰腺移植治疗糖尿病的效果。 结果：(1)适当剂量的四氧嘧啶能诱导建立稳定的糖尿病大鼠模型，血糖升高并稳定，胰岛素水平降低。(2)行胰腺移植后糖尿病大鼠血糖迅速下降至正常，胰岛素水平有所回升，并能维持稳定。 结论：(1)使用四氧嘧啶能建立稳定的I型DM大鼠模型；(2)以DM大鼠为受体进行胰腺移植能够使DM大鼠的血糖和胰岛素恢复至正常水平，是一个成功的移植模型；(3)改良的手术方法能改善手术成功率和大鼠存活时间，提高了该模型的实验使用价值，为进一步的研究奠定了基础。 第二部分RANTES和IL-10在大鼠胰十二指肠移植后急性排斥反应中的意义 目的：探讨RANTES和IL-10在大鼠胰十二指肠移植后急性排斥反应中的意义。 方法：SD大鼠60只分为两组，实验组取40只SD大鼠，以全胰十二指肠为供体，行20次SD-SD大鼠胰腺十二指肠移植；所余20只SD大鼠行开腹左肾切除对照组。分别在12h、1d、2d、3d取血清用ELISA法检测RANTES和IL-10的变化；取移植组织行HE染色后观察病理学改变。。 结果：(1)移植组移植胰腺出现急性排斥反应，组织肿胀、坏死渐进性加重，镜下单个核细胞浸润逐渐明显，在3d时最重。(2)血清RANTES明显升高(P<0．05)并且在3d内较为稳定。(3)IL-10的水平明显高于正常(P<0．05)并在3d内缓慢升高。(4)假手术组炎症浸润表现不明显，血清RANTES和11-10水平无明显上升(P＞0．05)。 结论：(1)大鼠胰腺十二指肠移植模型可以观察到明显的急性移植排斥反应，其发生比较肯定，是研究胰腺移植的良好的模型；(2)大鼠同种异体胰十二指肠移植后T淋巴细胞的浸润与RANTES的表达有密切的联系，在RANTES高表达的同时有T淋巴细胞的大量浸润；(3)IL-10在大鼠同种异体胰十二指肠移植后有明显的上升，一定程度上能反映排斥程度的加重；(4)血清RANTES和IL-10的检测有望作为判断急性排斥反应的客观指标之一，具有潜在应用价值。 第三部分FK506／PDTC治疗对胰十二指肠移植大鼠的作用 目的：探讨FK506／PDTC单独或联合治疗对胰十二指肠移植大鼠的作用。 方法：SD大鼠64只分为4组，每组移植8例。未干预组：行大鼠胰腺十二指肠移植不作干预；FK506组：行大鼠胰腺十二指肠移植，术后1．7d每日给予FK5060．5rog／kg皮下注射；PDTC组：移植后l-7d每日给予PDTC200mg／kg肌肉注射；FK506／PDTC联合治疗组：移植后1．7d每日按上述剂量和给药途径同时给予上述药物。分别在3d、7d分批处死各组4只大鼠，取移植物作HE染色观察病理改变；组织块行免疫组化染色和免疫荧光染色检测RANTES和CCR5的表达情况；留取血清检测各组RANTES和IL．10的改变。 结果：(1)未干预组出现典型的移植后急性排斥反应，镜下观察到单个核细胞的渐进性浸润，移植物实体细胞的减少和纤维坏死组织的增多，免疫组化和免疫荧光染色见到大量的RANTES和CCR5表达于移植组织中，7d时更明显。血清RANTES明显增高呈时间依赖性，7d时最高（P<0．05)；IL-10明显增高（P<0．05)，7d内缓慢升高。(2)FKS06组镜下见到排斥反应减轻，单个核细胞的浸润减少，7d时纤维增生不明显；免疫组化可见RA．NTES和CCR5的表达强度为中等，7d时未见加重。血清RANTES和IL-10有增高，但较未干预组明显减低。(3)PDTC组镜下见到排斥反应减轻，单个核细胞的浸润减少更为显著，7d时纤维增生不明显；免疫组化可见RANTES和CCR5的表达强度为中等，7d时未见加重。血清RANTES和IL-10有增高，但较未干预组明显减低。(4)FK506／PDTC联合治疗组镜下见到明显的排斥反应减轻，单个核细胞浸润明星减少，7d内未见排斥加重；血清RANTES浓度进一步下降，较接近正常值，IL-10水平与FK506／PDTC单干预组相似，7d内基本维持稳定。 结论：(1)大鼠胰十二指肠移植后早期出现明显的排斥反应表现和相关细胞因子水平的改变，有时间依赖性。(2)FK506和／或PDTC能够显著降低胰十二指肠移·植大鼠RANTES及其受体CCR5的分泌和表达，二者联合应用具有协同作用。(3）FK506和／或PDTC对移植物具有明显的保护作用，显著减轻了移植物炎症细胞的浸润，延缓了组织的破坏和纤维化，具有潜在应用价值，二者联合应用表现出一定的协同作用。 炎症反应是机体的防御反应，在免疫学领域具有重要地位。趋化因子作为期中的一个部分，贯穿于炎症反应的始终，存在于体液免疫和细胞免疫的各个时期，与免疫细胞和效应分子相互作用形成精密而严谨的免疫网络，研究趋化因子的调控机制具有重要意义。

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文摘

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第一部分大鼠胰十二指肠移植模型的建立

第二部分RANTES和IL-10在大鼠胰十二指肠移植后急性排斥反应中的意义

第三部分FK506/PDTC治疗对胰十二指肠移植大鼠的作用

RANTES的调控机制

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