江浙部分地区不同禽源新城疫病毒的分子流行病学及其生物学特性

摘要

新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种禽类的急性、高度接触性、毁灭性疾病，被列为A类动物传染病，给世界各地养禽业带来巨大威胁。由于NDV是单股负链RNA病毒，有很高的变异能力，其基因型的变化非常迅速，因而近年来不同禽源NDV的致病力也明显增强。 目前对病毒的分子流行病学研究主要有三种方法，利用单克隆抗体技术进行的基因分型，限制性核酸内切酶分析，特定基因片段的体外扩增及序列测定和绘制系统发育进化树。如果加强ND流行毒株分子流行病学研究，并筛选出不同禽源均适用的具有优良免疫原性的毒株作为良好的疫苗株，则可以一定程度上防止该病的流行。本试验从江苏及其周围地区分离到源于三黄鸡、乌骨鸡、鸭、鹅、孔雀等禽类的12株NDV，取其具有代表性的7株进行了基因分型、生物学特性研究和免疫原性比较。 选择F基因起始密码子开始的1-385bp核苷酸序列，对其进行克隆及核苷酸序列分析。测定结果表明，其中6个毒株F蛋白的裂解位点氨基酸组成为<'112>R／K-R-Q-K／R-R<'117>，具有强毒株裂解位点氨基酸组成特点，与ICPI和IVPI测定结果相吻合；核苷酸序列同源性分析显示，6株分离毒株核苷酸序列具有95.9％-100％的同源性，与F<,48>E<,9>的核苷酸序列同源性达85.8％-89.3％。对本试验的6个毒株和国内现已克隆测序的NDV毒株以及国外部分毒株其23株绘制基因系统发育进化树，结果表明6株归属于基因Ⅶ型。 本试验测定了分离于三黄鸡、乌骨鸡、孔雀、鹅、鸭等不同禽源的7株NDV的血凝特性、血凝解脱时间、鸡胚半数死亡量、脑内致病指数、静脉致病指数，并与NDV强毒株F<,48>E<,8>进行了比较，试验结果显示，7株NDV的毒力除分离自鸭的一株Y01属于弱毒株外，其余6株的毒力与F<,48>E<,8>相当。采用分离的基因Ⅶ型的NDV毒株和F<,48>E<,8>制成灭活疫苗，免疫试验鸡，进行免疫保护力比较试验。结果表明8株NDV的免疫原性有很大差异，SHJ00对8株NDV的D值均大于等于1，具有较高的攻毒保护率，故免疫原性最佳；F<,48>E<,8>、SHJ02、E01、KQ02、Y03、Y01依次降低，WGJ02对其它7株病毒的D值均小于1，攻毒保护率最低，免疫原性最差。SHJ00、SHJ02具有艮好的免疫原性，可以考虑作为针对不同禽源源的优良疫苗株。

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摘要

第一篇文献综述

试验部分 第二章NDV分离株F基因重要片段的克隆与序列分析

试验部分 第三章NDV分离株的生物学特性与免疫原性

全文总结

致谢