菊薯愈伤组织诱导及再分化初步研究

摘要

选择菊薯优良株系为试验材料，以嫩叶、腋芽、冠芽等为外植体，分别对消毒程序、筛选方法、愈伤组织诱导、不定芽分化诱导、继代增殖培养、生根诱导培养等离体快繁过程中的各个环节进行了初步研究。 外植体消毒试验结果表明：不同外植体对0．1％HgCl2溶液的敏感性存在着一定的差异，但均达到较好的消毒效果。其消毒程序为：流水冲洗2～3h后，用浓度70％～75％酒精表面消毒10～15s后，无菌水冲洗2～3次，再用0．1％HgCl2消毒8min，无菌水冲洗3～5次。 在外植体筛选和愈伤组织诱导试验中发现，适合无菌苗培养的外植体材料有叶片、腋芽、茎节组织和块茎冠芽等。 研究发现菊薯离体培养分化成苗至少有三种途径：即无菌短枝型、器官发生型、器官直接转变型。 研究结果表明，适合菊薯外植体材料诱导愈伤组织的最佳培养基是：MS+6-BA1～1．5 mg·L-1+NAA0．5～1．0 mg·L-1+3％蔗糖+0．7％琼脂，pH值5．8。最适宜的诱导培养时间为：7～10d。。 不定芽分化诱导的研究结果表明，来源不同的愈伤组织对不同激素和配比所表现出的分化诱导效应不同，进行不定芽诱导的最佳培养基是：MS+6-BA1．0 mg·L-1+NAA0．1mg·L-1+3％蔗糖+0．7％琼脂，pH值5．8，诱导分化率达79．28％．最适宜的诱导培养时间为60～80d。 在继代增殖培养研究中发现：菊薯愈伤组织在继代培养时极易发生褐化而死亡； 6-BA、NAA、GA3对菊薯不定芽继代增殖影响的主次顺序是6-BA、GA3和NAA；对不定芽生长影响的主次顺序是GA3、6-BA、NAA；不定芽继代增殖效果最佳的培养基为：MS+6-BA1．0mg·L-1+NAA0．01 mg·L-1+GA30．1mg·L-1，增殖率为567％。 生根诱导试验结果表明：菊薯试管苗具有极易生根的特性。大量元素对生根率具有一定的影响，以1/2MS+NAA0．01 mg·L-1作为生根培养基最适宜，生根率达到88．89％。不同浓度的为NAA对生根诱导率影响不明显，但具有壮苗和加快生根速度的作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

致谢

1.文献综述

1.1 植物组织培养概述

1.1.1 植物组织培养的概念和理论基础

1.1.2 植物组织培养发展简史

1.1.3 植物组织培养形态发生途径

1.1.4 植物组织培养技术的发展过程

1.1.5 植物组织培养在生产上的应用

1.2 菊薯研究文献综述

1.2.1 菊薯植物学分类地位及名称

1.2.2 菊薯的生物学特征及引种栽培

1.2.3 菊薯利用价值及市场状况

1.2.4 菊薯组培研究进展

1.3 本研究的目的与意义

2.引言

3.材料与方法

3.1 试验材料

3.2 技术路线

3.3.试验方法

3.3.1 培养条件

3.3.2 外植体表面消毒方法的筛选

3.3.3 外植体的筛选

3.3.4 愈伤组织诱导

3.3.5 不定芽分化诱导

3.3.6 继代增殖培养

3.3.7 生根诱导培养

4.结果与分析

4.1 外植体消毒

4.1.1 不同处理时间对外植体污染率的影响

4.1.2 不同取材部位对污染率的影响

4.1.3 不同处理时间对外植体褐化死亡率的影响

4.2 外植体的筛选

4.3 愈伤组织诱导

4.3.1 不同类型外植体对愈伤组织诱导的影响

4.3.2 不同激素配比对菊薯愈伤组织诱导的影响

4.3.3 不同培养时间对菊薯愈伤组织诱导影响

4.4 不定芽分化诱导

4.5 继代增殖培养

4.6 生根诱导培养

5.结论与讨论

5.1 结论

5.1.1 菊薯外植体离体培养时最佳消毒方法

5.1.2 外植体选择

5.1.3 菊薯离体培养分化成苗的途径

5.1.4 菊薯最佳愈伤组织诱导培养基

5.1.5 菊薯不定芽分化诱导的适宜条件

5.1.6 继代增殖培养

5.1.7 生根诱导培养

5.2 问题讨论与工作建议

5.2.1 外植体污染防治与选择问题

5.2.2 愈伤组织诱导问题

5.2.3 不定芽分化诱导问题

5.2.4 继代增殖与愈伤组织褐化问题

图 版

参考文献