贯叶连翘提取工艺及质量控制体系的构建

摘要

该论文综合运用了各种提取分离与纯化技术、各种现代色谱技术对贯叶连翘提取物的制备工艺、贯叶连翘药材和提取物的质量标准和指纹图谱进行了研究,具体内容如下:(1)采用高效液相色谱技术及高效液相色谱-质谱联用技术,选取贯叶连翘提取物中的10个功效成分作为考察指标,综合考察了了该实验室原有提取物制备工艺对各功效成分的富集程度、工艺的批内稳定性、批间稳定性以及抗氧化剂和药材对提取物中各成分的影响.通过上述分析,明确了工艺改进及质量控制的重点和方向.(2)根据1的结果,使用正交实验法、双因素实验法及单因素实验法等,综合使用总金丝桃素含量、总金丝桃素得量、贯叶金丝桃素含量、贯叶金丝桃素得量、总黄酮含量及总黄酮得量作为考察指标,考察了提取温度、抗氧化剂用量、酸沉前浓缩倍数、酸沉pH值及酸沉时间等因素对上述指标的影响,优化了贯叶连翘制取物的制备工艺.(3)制定了贯叶连翘药材和提取物的质量标准.系统地规范了贯叶连翘药材和提取物的质量控制的各项指标:来源、采集加工、制备工艺、性状、鉴别(包括形态鉴别和薄层鉴别)、检查、含量测定(包括色谱条件和系统适用性实验、对照品和供试溶液的制备、测定方法等)、功能与主治,贮藏等,并对提取物的保存条件和保存稳定性进行了初步的研究.在上述工作的基础上,完成了贯叶连翘药材质量标准草案、贯叶连翘药材质量标准起草说明、贯叶连翘提取物质量标准草案和贯叶连翘提取物质量标准起草说明.(4)贯叶连翘提取物指纹图谱的初步研究.采用高效液相色谱技术对贯叶连翘药材和提取物的色谱指纹图谱进行研究,并采用高效液相色谱-质谱技术对贯叶连翘药材和提取物中的成分进行归属.在上述基础上初步确定贯叶连翘药材的特征指纹峰,并选取17个成分作指标,考察了在10批提取物的色谱指纹图谱之间上述17个成分相对保留时间的一致性、相对峰面积的一致性;采用直观分析法对10批贯叶连翘提取物的色谱图作直观比较,考察10批提取物指纹图谱的相似性、主要成分保留时间和峰面积相对比例的一致性;并采用相似度计算软件计算各指纹图谱的相似度.结果表明,所建立的贯叶连翘药材和提取物质量的色谱指纹图谱分析方法具较好的稳定性、重现性和普遍适用性,所建立的贯叶连翘药材和提取物的指纹图谱可为贯叶连翘药材和提取物的质量控制提供更全面的信息.

目录

文摘

英文文摘

第1章绪论

1.1贯叶连翘的主要化学成分

1.1.1萘骈二蒽酮类

1.1.2间苯三酚类

1.1.3黄酮类

1.2药理作用研究

1.2.1抗抑郁作用

1.2.2抗病毒和抗癌作用

1.2.3抗菌消炎作用

1.2.4其它作用

1.3贯叶连翘的副作用及不良反应

1.3.1毒性

1.3.2光敏性

1.4提取物制备工艺

1.5质量标准和指纹图谱技术

1.5.1贯叶连翘及其提取物的质量标准研究现状

1.5.2中药指纹图谱研究现状

1.6本研究的目的、意义和研究思路

第2章贯叶连翘提取物制备工艺的多指标综合分析

2.1样品、试剂和仪器

2.1.1样品

2.1.2试剂

2.1.3仪器

2.2实验方法

2.2.1提取物ZSU202的制备工艺

2.2.2药材及其提取物ZSU202的HPLC及HPLC-MS分析

2.3结果与讨论

2.3.1 HPLC色谱条件的选择

2.3.2提取物ZSU202的HPLC指纹谱中主要成分的指认

2.3.3 HPLC分析的方法学考察

2.3.4 HPLC指纹图谱对ZSU202提取工艺的考察

第3章贯叶连翘提取物制备工艺的优化

3.1样品、试剂和仪器

3.2实验方法

3.2.1正交实验法优化提取条件

3.2.2单因素法优化提取时间

3.2.3单因素法考察酸沉时间

3.2.4双因素法优化酸沉前浓缩倍数、酸沉pH值。

3.3分析方法

3.3.1待测样品溶液的制备与测定

3.3.2总黄酮的含量测定

3.3.3 UV法测定金素桃素类总含量

3.3.4贯叶金丝桃素含量的测定

3.4结果与讨论

3.4.1正交实验法对提取条件的优化

3.4.2单因素考察法优化提取时间的结果分析

3.4.3单因素法考察酸沉时间的结果分析

3.4.4双因素法优化酸沉前浓缩倍数、酸沉pH值的结果分析

第4章贯叶连翘药材质量标准的研究

4.1仪器

4.2对照品和试剂

4.3实验材料

4.4实验方法

4.4.1贯叶连翘药材的薄层鉴别

4.4.2贯叶连翘药材杂质检查实验研究

4.4.3贯叶连翘药材主要成分含量测定研究

4.5结果与分析

4.5.1贯叶连翘药材的薄层鉴别

4.5.2贯叶连翘药材杂质检查实验研究

4.5.3主要成分含量测定

4.6讨论

第5章贯叶连翘提取物质量标准的研究

5.1仪器、试剂和对照品

5.2实验材料

5.3实验方法

5.3.1贯叶连翘提取物的薄层鉴别

5.3.2贯叶连翘提取物杂质检查实验研究

5.3.3贯叶连翘提取物主要成分含量测定研究

5.3.4贯叶连翘提取物的保存条件研究

5.3.5贯叶连翘提取物的初步稳定性实验

5.4结果与分析

5.4.1贯叶连翘提取物的薄层鉴别

5.4.2贯叶连翘药材杂质检查实验研究

5.4.3主要成分含量测定

5.4.4贯叶连翘提取物的保存条件研究

5.4.5贯叶连翘提取物的初步稳定性实验

5.5讨论

第6章贯叶连翘药材和提取物指纹图谱的初步研究

6.1实验材料、试剂和仪器

6.2实验方法

6.2.1色谱条件的选择

6.2.2供试品溶液的制备

6.2.3 HPLC分析方法学考察

6.2.4样品的测试和HPLC-MS分析

6.3实验结果

6.3.1贯叶连翘药材指纹图谱的初步分析

6.3.2贯叶连翘提取物指纹图谱的研究

6.4讨论

第7章结语

参考文献

附录Ⅰ贯叶连翘提取物中部分成分的Ms碎片图及UV光谱图

附录Ⅱ贯叶连翘药材和提取物的质量标准草案起草说明

贯叶连翘药材质量标准草案(内控标准)

贯叶连翘药材质量标准草案(内部标准)起草说明

贯叶连翘标准提取物质量标准草案(内控标准)

贯叶连翘提取物质量标准草案(内部标准)起草说明

附录 Ⅲ 在学期间发表论文

致谢

本人郑重声明