基于异鼠李素为杂交指示剂的电化学DNA生物传感器的研究

摘要

DNA电化学生物传感器是近几年迅速发展起来的一种全新的生物传感器，它是进行核酸结构分析和检测的重要手段之一，其特点是测定快速、简便、灵敏、价廉。 DNA电化学生物传感器研制的关键技术之一是高灵敏度杂交指示剂的筛选。本论文以电化学和紫外.可见光谱方法为主要研究手段，对具有抗癌、抗菌活性的黄酮类化合物异鼠李素电化学性质及与鲑鱼精DNA的相互作用机理进行了研究，筛选出异鼠李素作为高灵敏度、高特异性的杂交指示剂，用于检测急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因。 实验结果表明，黄酮类小分子异鼠李素在优化的条件下以嵌插方式结合到dsDNA双螺旋碱基对中。由电化学研究结果可以看出，异鼠李素与dsDNA之间形成了一种非电活性的超分子化合物而导致峰电流减小。紫外-可见光谱显示dsDNA的加入导致最大吸收峰减色并伴有红移，此现象证实异鼠李素与鲑鱼精dsDNA发生嵌插结合。由电化学动力学参数结合率和结合常数的测定可知，异鼠李素与DNA形成2:1复合物，结合常数为1.03×105L/mol。 以异鼠李素为杂交指示剂，选用共价键合法制备了DNA电化学传感器，该传感器具有高特异性、高灵敏度、较低检测限。当互补链DNA浓度在2.0×10-5～1.2×10-7mol/L范围内，峰电流与其浓度呈良好的线性关系，线性回归方程为Ip(μA)=0.2378C(μM)+2.269，相关系数r=0.9973，检出限为1.5×10-9 mol/L(S/N=3)。 本文首次研制的基于异鼠李素为新型杂交指示剂的电化学生物传感器用于检测急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因，获得了令人满意的结果。

目录

论文说明：英文缩写词表

声明

前言

第一部分 异鼠李素在碳糊电极上的伏安行为及其测定

一、材料与方法

二、结果与讨论

参考文献：

第二部分 异鼠李素与DNA相互作用的机理研究

一、材料与方法

二结果与讨论

参考文献：

第三部分 以异鼠李素作为指示剂检测急性早幼粒细胞白血病PML-RARα基因的DNA电化学生物传感器的研制

一、材料与方法

二、结果与讨论

结论

致谢

综述：应用于电化学DNA生物传感器的杂交指示剂的研究进展

攻读硕士学位期间发表的论文