PLK1和PCNA在乳腺癌组织中的表达及临床意义

摘要

背景与目的 细胞周期调控是肿瘤学研究的热点。研究肿瘤细胞生长的关键调节基因，并采用有效的方法封闭这些基因，无疑将是肿瘤基因诊断治疗的关键途径。PLK(polo like kinase)1是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在有丝分裂中扮演关键角色，与细胞有丝分裂期的多个事件密切相关，如中心体复制，纺锤体形成，染色体分离以及胞质分裂等，目前研究发现， PLK1与肿瘤的发生发展预后密切相关，正成为肿瘤诊治的新靶点。增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclearantigen，PCNA)是在1978年由Miyachi发现的核内蛋白，在细胞周期中有着十分重要的作用。近年已证实PCNA系DNA多聚酶D之辅酶，DNA多聚酶D在PCNA活化下参与增殖细胞核内DNA的合成。PCNA、 Cyclin、CDKs和p21组成四聚体调节细胞周期和增殖。PCNA含量与细胞的增殖状态密切相关，可作为反映肿瘤细胞增殖程度和预后判断的指标，可以作为肿瘤诊治的靶点。乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，其已居妇女恶性肿瘤死因的首位。 本研究旨在探讨PLK1、增殖细胞核抗原(PCNA)在乳腺癌组织中的表达情况，分析二者之间的相互关系以及与乳腺癌临床病理特征、激素受体状态及HER-2表达的关系，研究PLK1、PCNA表达在乳腺癌中的临床意义，为乳腺癌的诊断寻找新的标志物，为乳腺癌的治疗寻找新的靶点。 病人与方法 随机取32例Ⅰ～Ⅲ期乳腺癌患者癌组织石蜡包埋标本，均在我院行乳腺癌根治性手术切除，并经病理确诊。除外行新辅助放化疗、既往有其他恶性肿瘤者。同时取16例乳腺良性增生组织作为对照。通过临床和病理记录获得包括年龄、组织学类型、肿瘤分化程度、肿瘤大小、淋巴结状态、分期等临床病理特征资料及人类表皮生长因子受体2(HER-2)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达状态。根据2003年AJCC和UICC乳腺癌国际分期提供的标准进行临床分期。 免疫组化采用SP法。由两位病理医师分别双盲阅片，按肿瘤细胞阳性细胞率和着色强度分别进行记分。用阳性细胞百分率记分与免疫染色强度记分相乘来计算免疫反应得分，表达强度分为：0分为无色，1分为淡黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色；按表达阳性细胞百分率分为4组：0分为无阳性细胞，1分为阳性细胞≤10％，2分为阳性细胞11％～50％，3分为阳性细51％～80％，4分为阳性细胞>80％，最终分数按以上表达强度及阳性率两个参数的乘积计算，分为0～2分(-)，3～6分(+)， 7～9分(++)，10～12分(+++)，据此，≤6分计为阴性，>6分计为阳性。统计学处理采用SPSS13.0统计软件，应用x<'2>检验、Spearman等级相关分析，P<0.05被认为有统计学意义。 结果 1．PLK1在乳腺癌组织和乳腺良性增生组织中的表达乳腺癌细胞中，PLK1蛋白主要表达于肿瘤细胞胞浆中。PLK1蛋白在乳腺癌细胞中阳性表达率为56.3％(18/32)，而乳腺良性增生组织阳性表达为0，差异具有显著性(x<'2>=14.4，P<0.05)。 2．PCNA在乳腺癌组织和乳腺良性增生组织中的表达乳腺良性增生组织PCNA的阳性率12.5％(2/16)，乳腺癌组织中PCNA的阳性表达率为71.9％(23/32)，二者比较，差异具有显著性(x<'2>=15.068，P=0.000)。 3．PLK1和PCNA在乳腺癌中的表达与临床病理学特征的关系PLK1蛋白在乳腺癌中的表达阳性率与年龄、组织学类型、肿瘤大小、淋巴结状态、分期等因素无关(P>0.05)，但与肿瘤分化程度相关，差异具有显著性(P<0.05)。PCNA在乳腺癌中的表达阳性率与肿瘤分化程度表达有关，差异具有显著性(P<0.05)，与年龄、组织学类型、肿瘤大小、淋巴结状态等因素无关(P>0.05)。 4．PLK1和PCNA在乳腺癌中的表达与激素受体及HER-2表达状态的关系PLK1蛋白在乳腺癌中的表达阳性率与ER、PR表达有关，差异具有显著性(P<0.05)。PCNA在乳腺癌中的表达阳性率与ER表达有关，差异具有显著性(P<0.05)，与PR表达无关(P>0.05)。两者均与HER-2表达无关(P>0.05)。 5．乳腺癌组织中PLK1蛋白表达与PCNA的关系PLK1与PCNA之间具有显著正相关性(r=0.429，P<0.05)。 结论 1．PLK1在乳腺癌中的表达明显高于乳腺增生组织，与肿瘤分化程度有关，与肿瘤大小、淋巴结状态、分期无关，可能是肿瘤发生的一个早期事件，在癌的发生发展中起着重要作用，因而可作为新的肿瘤标志物。 2．PCNA在乳腺癌中的表达明显高于乳腺增生组织，与肿瘤分化程度有关，与肿瘤大小、淋巴结状态、分期无关，可能是肿瘤发生的一个早期事件，在癌的发生发展中起着重要作用，因而可作为新的肿瘤标志物。 3．PLK1在乳腺癌中的表达与ER、PR表达成负相关，ER、PR阴性的乳腺癌较ER、PR阳性的乳腺癌增殖能力强，预后差，提示PLK1通过某种机制辅助激素受体阴性的乳腺癌进行增殖。 4．PCNA在乳腺癌中的表达与ER表达成负相关，ER阴性的乳腺癌较ER阳性的乳腺癌增殖能力强，预后差，提示PCNA通过某种机制辅助激素受体阴性的乳腺癌进行增殖。 5．PCNA是反映细胞增殖状态的理想标志物，是评价肿瘤进展的重要参数，并且还与预后密切相关。PLK1与PCNA成显著正相关，相关指数是0.44。表明PLK1可能反映乳腺癌的增殖活性，可能对预后判断也有作用。提示PLK1可能通过不同的途径促使细胞分裂，加速肿瘤细胞的恶性增殖。

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讨论

结论

参考文献

附表

附图

综述：细胞周期与肿瘤

攻读学位期间取得的研究成果

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