不同负荷运动对老龄小鼠骨骼肌mTOR、p70和ERK1/2磷酸化表达的影响

摘要

目的： 随着年龄的增长，骨骼肌经历了重大的萎缩，功能衰弱。虽然抗阻训练能增加骨骼肌质量和肌力，但是对这种训练的肌源性反应及其在老年动物和人类中肌肥大能力的机制了解有限，而且与年龄相关的细胞信号传导通路的变化以及受训练影响的程度变化都不清楚。本文观察12周不同负荷运动后老龄小鼠骨骼肌mTOR、p70s6k和ERK1/2磷酸化表达的变化，旨在探讨运动调节衰老骨骼肌蛋白质合成翻译信号通路的机制，同时为选择有效延缓骨骼肌衰老的运动形式和为制定中老年人健身运动处方提供科学方法和理论依据。 材料与方法： 本研究选取6月龄和15月龄雌性昆明种小鼠为研究对象。其中6月龄小鼠为成年对照组，15月龄小鼠随机分为老年对照组和老年运动组，老年运动组又分为：无负荷游泳运动组、渐增负荷游泳运动组和交替运动组。12周运动结束后24-48小时，快速取小鼠双侧后肢股直肌，称重、编号，放入Eppendorf管中，液氮速冻，-80摄氏度冰箱保存。应用Western blotting分子生物学技术得到目标蛋白图片，用凝胶成像分析软件得到图片上特异条带的灰度值。目标蛋白灰度值除以内参灰度值得到目标蛋白的相对含量。每组数据用平均数±标准差(Mean±SD)表示。数据采用SPSS13.0统计分析软件进行统计分析，各组之间的差异性用独立样本T检验分析，P<0.05为显著性差异。 结论： 1.随着年龄的增长，骨骼肌蛋白质合成代谢能力下降，老年小鼠发生骨骼肌衰老； 2.无负荷运动不能有效增加骨骼肌质量和力量； 3.抗阻训练可以有效激活骨骼肌内蛋白质合成信号通路，增加骨骼肌蛋白质合成，提高骨骼肌质量和力量，延缓骨骼肌衰老。

目录

文摘

英文文摘

声明

1绪论

1.1问题提出

1.2选题意义

1.3文献综述

1.3.1骨骼肌衰老的概念

1.3.2骨骼肌衰老发生机制的研究

1.3.3骨骼肌衰老干预手段的研究

1.3.4抗阻训练与骨骼肌mTOR、p70s6k信号通路的研究

1.3.5抗阻训练与ERK1/2信号传导通路的研究

2实验材料与方法

2.1实验动物分组

2.2实验动物模型建立

2.3取材与样本制备

2.4主要试剂与仪器

2.5主要测试指标

2.6 Western blotting

2.7数据处理

3结果与分析

3.1各组实验对象实验前体重和实验后体重

3.2各组实验对象股直肌质量

3.3各组实验对象股直肌肌蛋白浓度

3.4各组实验对象mTOR、P70s6k和ERK1/2总蛋白相对含量

3.5各组实验对象mTOR、P70s6k和ERK1/2磷酸化蛋白相对含量及变化率

3.6各蛋白激酶磷酸化表达、肌蛋白浓度、肌质量之间的相关性分析

4讨论

4.1年龄对小鼠体重、骨骼肌质量和骨骼肌蛋白浓度的影响

4.2年龄对小鼠骨骼肌mTOR、P70s6k和ERK1/2总蛋白及磷酸化蛋白表达的影响

4.3不同负荷运动对老年小鼠体重、骨骼肌质量和骨骼肌蛋白浓度的影响

4.4不同负荷运动对老年小鼠骨骼肌mTOR总蛋白及磷酸化蛋白表达的影响

4.5不同负荷运动对老年小鼠骨骼肌p70s6k总蛋白及磷酸化蛋白表达的影响

4.6不同负荷运动对老年小鼠骨骼肌ERK1/2总蛋白及磷酸化蛋白表达的影响

5结论

致谢

参考文献