外源物质对不同倍性白花泡桐体外植株再生及幼苗蛋白质变化影响研究

摘要

泡桐是一种深受我国广大劳动人民喜爱的速生用材和绿化树种，但泡桐生产中一直存在的丛枝病发生严重和低干大冠等问题，严重影响了人们种植泡桐的积极性。由于泡桐愈伤组织诱导时间短并且处于相同分裂周期的愈伤组织较多，有利于生理生化的研究；本试验利用DNA甲基化转移酶抑制剂（5-Aza）和组蛋白去乙酰化转移酶抑制剂（苯丁酸、Chaps）对二倍体和四倍体白花泡桐体外植株再生的影响以及幼苗形态蛋白的变化，进而探讨5-Aza、苯丁酸和Chaps对泡桐叶片芽诱导、幼苗形态变化、蛋白质表达结果，最终了解5-Aza、苯丁酸和Chaps对泡桐生长发育的影响。主要结果如下： 1、外源物质抑制泡桐体外植株再生5-Aza、Chaps、苯丁酸对二倍体和四倍体白花泡桐的叶片芽诱导具有抑制作用，并且随着5-Aza、Chaps、苯丁酸浓度的升高抑制作用增强；5-Aza、Chaps、苯丁酸对二倍体和四倍体白花泡桐的根诱导具有抑制作用，随着5-Aza、Chaps、苯丁酸浓度的升高抑制作用增强。外源物质对二倍体白花泡桐的体外植株再生抑制作用大于四倍体白花泡桐体外植株再生。 2、外源物质对幼苗形态变化产生明显影响用5-Aza、Chaps、苯丁酸处理二倍体和四倍体白花泡桐幼苗形态变化存在一定的差异，经5-Aza处理的泡桐出现了芽丛生和植株矮化，苯丁酸处理的泡桐均出现了根部有大量愈伤组织，伴随5-Aza、苯丁酸浓度的增加，幼苗的症状越明显。经Chaps处理的二倍体和四倍体白花泡桐泡桐幼苗形态变化不明显，随着外源物质浓度的增大生长抑制作用增强。 3、外源物质对幼苗叶片蛋白质的变化产生了影响经5-Aza、Chaps、苯丁酸处理二倍体和四倍体白花泡桐幼苗进行蛋白质双向电泳发现，等电点、分子量、蛋白质含量在不同外源物质、同种外源物质不同浓度处理的幼苗中存在着差异。经5-Aza处理的二倍体白花泡桐幼苗，蛋白质PI6．6、22KD（a），PI6．5、21．8KD（b），PI5．4、14．5KD（k）增强表达，蛋白PI5．2、17．3KD（e），PI5．2、16．7KD（f）减弱表达：而经5-Aza处理四倍体白花泡桐叶片蛋白质PI6．6、22KD（a），PI6．5、21．8KD（b）逐渐渐弱；蛋白质PI5．2、17．3KD（e）和PI5．8、PI5．2、16．7KD（f）逐渐减弱直至消失。经苯丁酸处理二倍体白花泡桐叶片出现特异蛋白质5．2、17．3KD（e），5．8、16．5KD（o）；经苯丁酸处理四倍体白花泡桐叶片蛋白质PI6．6、22KD（a），PI6．5、21．8KD（b），PI5．2、16．7KD（f）是差异蛋白质。经Chaps处理白花泡桐叶片蛋白质可以发现，随着Chaps浓度增加蛋白质PI6．4、20．1KD（p），PI6．56、19．8KD（q）逐渐增强，并且出现了差异蛋白质PI5．2、17．3KD（e）；经chaps处理四倍体白花泡桐叶片蛋白质双向电泳蛋白PI6．6、22KD（a），PI6．5、21．8KD（b）先减弱后增强，PI5．2、16．7KD（f）一直减小。

目录

文摘

英文文摘

声明

致谢

1 文献综述

1.1 植物DNA的甲基化及其生物学意义

1.1.1 植物DNA甲基化及其特点

1.1.2 DNA甲基化抑制剂及其作用机理

1.1.3 DNA甲基化检测方法

1.1.4 植物DNA甲基化生物学意义

1.2 植物组蛋白修饰及其生物学意义

1.2.1 组蛋白修饰及其特征

1.2.2 组蛋白修饰的生物学意义

1.3 展望

引言

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.2 试验方法

2.2.1 外源物质对二倍体和四倍体泡桐芽诱导影响

2.2.2 外源物质对二倍体和四倍体泡桐幼苗体生根的影响

2.2.3 外源物质对二倍体和四倍体白花泡桐幼苗形态变化的影响

2.2.4 外源物质对二倍体和四倍体泡桐幼苗蛋白质变化的影响

2.2.5 幼苗的形态观察、统计、试验数据计算及处理

3.结果与分析

3.1 外源物质对二倍体和四倍体白花泡桐叶片体外植株再生的影响

3.1.15—Aza对二倍体和四倍体体外植株再生的影响

3.1.2 苯丁酸对二倍体和四倍体泡桐叶片体外植株再生的影响

3.1.3 Chaps对二倍体和四倍体泡桐叶片体外植株再生的影响

3.2 外源物质对二倍体和四倍体白花泡桐幼苗形态变化的影响

3.3 外源物质对二倍体和四倍体白花泡桐蛋白质变化的影响

3.3.1 外源物质对二倍体泡桐蛋白质变化的影响

3.3.2 外源物质对四倍体白花泡桐蛋白质变化的影响

3.讨论

4 参考文献

图版