葡萄球菌对常用大环内酯类、克林霉素的耐药性及耐药基因和分子流行病学研究

摘要

引言： 大环内酯类(Macrolides)、林可酰胺类(Lincosamides)、链阳菌素类(Streptogramins)是一类结构不同但功能相近的药物，合称为MLS药物。常用于葡萄球菌感染的治疗，随着该类药物临床应用的增多，近年来葡萄球菌对大环内酯类、林可酰胺类的耐药越来越严重。在葡萄球菌中最主要的，也是最早发现的耐药机制是由红霉素核糖体甲基化酶(erythromycin ribosome methylase，erm)基因介导的修饰MLS药物在核糖体上的作用位点，其次是msrA(macrolidestreptogramins resistance)基因介导的主动外排机制。且细菌耐药性可以通过垂直或水平传播等方式进行播散。本研究通过对安徽省部分医院金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物的耐药性的分析，对常见耐药基因的检测，及耐药菌株DNA指纹图谱的构建，了解了本地区葡萄球菌对大环内酯类抗菌药物的耐药情况，探讨了细菌耐药的分子生物学机制及分子流行病学特征，为本地区开展葡萄球菌感染的防治、耐药的监测、传染源的追踪及传播途径调查等工作提供实验室依据。 目的：了解安徽省部分医院金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物的耐药性，以指导临床合理用药。了解金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物的常见耐药基因型别。了解耐药菌株分子流行病学特征。 方法： 采用M-H琼脂稀释法进行药敏试验，结果按照美国临床实验室标准化委员会(CLSL/NCCLS2006版)标准进行判断。按照CLSL/NCCLS2006版标准进行双纸片法D试验。用PCR法检测目的基因。ERIC-PCR法进行分子流行病学研究。 结果： 328株葡萄球菌对临床常用4种大环内酯类抗菌药物高度耐药，金葡菌总耐药率为84.5％，其中MRSA的耐药率为92.8％，MSSA为75.9％；表葡菌总耐药率为99.0％，其中MRSE的耐药率为99.8％，MSSE为96.3％；各耐药率有统计学差异。 185株金葡菌中表现对红霉素和克林霉素敏感或中介20株(10.8％)；对红霉素和克林霉素均耐药(cMLSB型)139株(75.1％)；对红霉素耐药而克林霉素敏感，D试验阳性(iMLSB型)9株(4.9％)；对红霉素耐药而克林霉素敏感，D试验阴性(MS型)10株(5.4％)；对红霉素敏感或中介而克林霉素耐药7株(3.9％)。143株表葡菌中cMLSB型耐药139株(97.2％)，MS型耐药2株(1.4％)，无iMLSB型耐药株，红霉素敏感而克林霉素耐药有2株(1.4％)。 对红霉素耐药而对克林霉素敏感的19株金黄色葡萄球菌中，D试验阳性9株，占46.8％；对红霉素耐药而对克林霉素敏感的表皮葡萄球菌2株，D试验阴性。 158株红霉素耐药金葡菌中，ermA、ermB、ermC、msrA基因的阳性率分别为3.2％、7.0％、39.9％、7.0％；141株红霉素耐药表葡菌中，ermA、ermB、ermC、msrA基因的阳性率分别为2.8％、2.1％、55.3％、14.2％。 52株ermC基因阳性的表皮葡萄球菌ERIC-PCR的结果显示，指纹图谱共分43型，部分耐药菌株(1、2型)有相同的指纹图谱。 结论：安徽省临床分离葡萄球菌对大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物耐药显著，MRS菌株的耐药率超过80％，MSS菌株的耐药率也在70％以上。耐药表型检测中主要为结构型(cMLS型)耐药。耐药基因型别主要是ermC。耐药菌株间可能存在克隆(垂直)传播。

目录

论文说明：中英文缩略词表

声明

第一部分 临床分离葡萄球菌对大环内酯类和克林霉素的耐药性检测

1前言

2材料与方法

3结果

4讨论

参考文献

第二部分 葡萄球菌对大环内酯类、克林霉素常见耐药基因型别和耐药菌析分子流行病学特片检测

1.前言

2.材料与方法

3结果

4、讨论

参考文献

附录

致谢

综述1：大环内酯类抗生素抗菌作用及葡萄球菌对大环内酯类抗生素的耐药机制

综述2：葡萄球菌对林可酰胺类抗生素的耐药机制研究新进展