太湖水中微囊藻毒素的检测技术及其方法比对分析

摘要

近年来随着经济和工业进程的发展，人类活动对太湖生态系统产生了极大的影响，其中最突出的表现是湖泊的富营养化加剧，蓝藻水华的爆发是水体富营养化重要特征之一。微囊藻毒素是水华蓝藻产生的主要毒素，对水生生物、生活饮用水、食品安全和人类健康都构成严重威胁，因此对太湖水中微囊藻毒素的检测技术研究有十分重要的实际意义。
　　论文建立并优化了酶联免疫法、高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法检测水中微囊藻毒素中的方法。将方法应用于2009年6月至12月太湖XGK、XTG和HLZ三个港口的太湖水中三种微囊藻毒素进行监测，发现MC-RR检出率最高为71.4％;其次是MC-LR检出率为42.9％;MC-YR的检出率为28.6％。对气象因素与太湖水中微囊藻毒素的相关性进行了初步探讨，提示夏秋季节为微囊藻毒素浓度最高的季节，应加强防范，做好早期监测。
　　使用微囊藻毒素酶联免疫测试盒反复测试，发现酶联免疫法在0.25～4.0μg/L范围内线性良好，回收率为88.8％～92.0％，相对标准偏差在6.5％～14.5％。
　　通过对样品前处理和仪器条件进行优化，建立高效液相色谱法测定太湖水中LR、RR、YR三种微囊藻毒素，线性范围为0.01μg/mL～1.00μg/mL，回收率为85.3％～91.6％，相对标准偏差为1.0％～3.0％，定量检测限为0.011μg/L～0.017μg/L。
　　采用相同的样品前处理方法，通过优化的三重四级杆超高压液相色谱-串联质谱法测定太湖水中LR、RR、YR三种微囊藻毒素，线性范围为5μg/L～500μg/L，回收率为87.2％～110.1％，相对标准偏差为6.1％～9.6％，定量检测限为5×10-5μg/L～8×10-5μg/L。将该方法初步应用于太湖水产中微囊藻毒素的检测，在白虾样品中检出了微囊藻毒素RR、LR。
　　对上述三种检测方法进行分析比较，酶联免疫法对微囊藻毒素特异性强，商品化试剂盒操作简便。但不能检测不同类别的毒素，在没有配备液相色谱等仪器的条件下，适用于对批量阳性样品的初筛;液相色谱法因其快速、灵敏的优点，能够实际应用于太湖水中微囊藻毒素的测定。液相色谱-串联质谱法测定分析周期短，所需样品量少。但由于液质联用仪在基层实验室配备率仍然较低，更适用于对干扰严重和存疑的样品进行确证使用。各实验室可根据实际情况对检测方法进行选择。

目录

声明

摘要

主要符号对照表

第一章 绪论

1．1 微囊藻毒素概况

1．1．1 微囊藻毒素的理化性质

1．1．2 微囊藻毒素的危害

1．2 国内外检测技术现状

1．2．1 生物法

1．2．2 生物化学法

1．2．3 生物传感器法

1．2．4 分子生物学检测技术

1．2．5 仪器分析法

1．3 立题依据和研究目的

第二章 酶联免疫吸附法检测太湖水中微囊藻毒素

2．1．4 样品处理

2．1．5 样品检测

2．2 结果与讨论

2．2．1 线性范围

2．2．2 回收率试验

2．2．3 重现性测试

2．2．4 特异性试验

2．3 小结

第三章 高效液相色谱法检测太湖水中三种微囊藻毒素

3．1 实验部分

3．1．1 主要仪器

3．1．2 实验试剂

3．1．3 实验样品

3．1．4 标准物质

3．1．5 前处理方法

3．1．6 仪器条件

3．2 结果与讨论

3．2．1 胞内毒素提取条件的优化

3．2．2 固相萃取条件优化

3．2．3 色谱条件的优化

3．2．4 线性范围和检出限

3．2．5 回收率和精密度

3．2．6 试样测定

3．3 小结

第四章 三重四级杆超高压液相色谱-串联质谱法测定太湖水中的三种微囊藻毒素

4．1 实验部分

4．1．1 主要仪器

4．1．2 实验试剂

4．1．3 实验样品

4．1．4 标准物质

4．1．5 前处理方法

4．1．6 仪器条件

4．2 结果与讨论

4．2．1 仪器条件的优化

4．2．2 线性范围和检出限

4．2．3 回收率和精密度

4．2．4 试样测定

4．3 小结

第五章 酶联免疫法、液相色谱法和超高压液相色谱-串联质谱法测定太湖水中微囊藻毒素的比较

5．1 概述

5．2 方法比较

5．2．1 线性范围和检出限比较

5．2．2 回收率比较

5．2．3 精密度比较

5．2．4 检测速度比较

5．3 样品检测比较

5．3．1 检测结果比较

5．3．2 结果趋势对照

5．4 小结

第六章 太湖水中微囊藻毒素监测数据分析

6．1 监测概况分析

6．2 气象因素与太湖微囊藻毒素的相关性分析

6．2．2 某太湖沿岸城市基本气象特征

6．2．3 微囊藻毒素与气象因素的相关性分析

第七章 三重四级杆超高压液相色谱-串联质谱法测定太湖水产中的三种微囊藻毒素

7．1 实验部分

7．1．1 主要仪器

7．1．2 实验试剂

7．1．3 实验样品

7．1．4 标准物质

7．1．5 前处理方法

7．2．2 试样测定

7．3 小结

第八章 结论与展望

8．1 论文总结

8．2 展望

参考文献

致谢