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致谢
第一部分文献综述
第一章植物病原菌激发子与抗病防卫反应
1引言
2激发子的种类和性质
2.1寡糖
2.2糖蛋白
2.3多肽和蛋白质
3病菌激发子-受体识别机制
3.1激发子受体
3.2病原激发子-受体识别
3.3“保卫假说”
4信号识别、传导、防卫反应产生过程中植物与动物的相似性
4.1受体蛋白的结构
4.2磷酸化与脱磷酸化
4.3其它调控分子
5激发子诱导的抗病防卫反应基因表达的调控
5.1顺式作用元件的调控
5.2转录因子表达的调控和活性的调节
参考文献
第二章激发素(elicitins)研究进展
1引言
2 elicitins的发现
3 elicitins的基本结构和理化性质
3.1 elicitins的一级结构
3.2 elicitins的高级结构
3.3 elicitins的理化性质
4 elicitins的生物学作用
4.1 elicitins与HR反应
4.2 α 、β-elicitins诱导烟草HR反应差异的几种解释
4.3 elicitins诱导的抗病性(SAR)和基因工程
5 elicitins诱导的防卫信号传导
5.1 elicitins的受体
5.2 elicitins引发的防卫信号传导
6 elicitins诱导HR和SAR的寄主专化性
6.1 elicitins具有寄主专化性
6.2 elicitins寄主专化性不强
7 elicitins在疫霉菌致病性和生活史中的作用
8 elicitins的基因结构
9 elicitins蛋白诱导HR的关键氨基酸位点
10疫霉菌与植物的共进化-防御与反防御反应的统一
参考文献
第二部分实验研究
前言
第三章隐地蛋白(Cryptogein)基因的克隆、定点突变及其植物双元表达载体的构建
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
1.2.2植物双元表达载体的构建
1.2.3植物双元表达载体导入根癌农杆菌EHA105
2结果与分析
2.1 Crypt基因植物双元表达载体的构建
2.2 CryK13V基因植物双元表达载体的构建
2.3根癌农杆菌的转化与鉴定
3讨论
3.1启动子的选择
3.2 Crypt蛋白的13氨基酸位定点突变
33信号肽
3.4激发子基因
参考文献
附图
第四章Crypt和CryK13V基因的烟草转化及转基因植株的获得
1材料
1.1转化的受体植物
1.2菌株与质粒
1.3培养基与抗生素
2方法
2.1烟草叶片感染与卡那抗性植株的再生
2.2转基因烟草的分子生物学鉴定
3结果与分析
3.1 Crypt和CryK13V基因的烟草转化及卡那抗性植株的获得
3.2 Crypt和CryK13V基因与烟草基因组DNA的整合
3.3 Crypt和CryK13V基因在烟草植株中的转录
4.讨论
4.1影响转化效率的主要因素
4.2 Crypt蛋白13位氨基酸在诱导细胞坏死中的作用
4.3外源基因的转录
参考文献
附图
第五章Cryptogein基因功能的初步分析
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果与分析
2.1 T0、T1代转基因烟草植株的抗病性分析
2.2转基因烟草的耐盐性显著增强
2.3转Crypt和CryK13V基因的烟草植株其他农艺性状的变化
3讨论
3.1细胞死亡(HR)与防卫反应的建立
3.2耐盐性
3.3 Crypt和CryK13V基因的功能
参考文献
附图
第六章Crypt和CryK13V基因介导的烟草抗病和耐盐分子机理初探
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果与分析
2.1 T0代转基因烟草植株PR-1a基因的表达与抗病性
2.2 PR-1a基因的组成型表达与转基因烟草植株的抗病性
2.3 PR-1a基因的诱导表达与转基因烟草植株抗病性
2.4转录因子OPBP1的活化与转基因烟草植株耐盐、抗病性
2.5渗调蛋PR5基因的表达与转基因烟草植株的耐盐性
3讨论
3.1防卫反应相关基因的表达与抗病性
3.2防卫反应相关基因的表达与耐盐性
参考文献
附图
第七章转Crypt和CryK13V基因烟草植株的遗传分析
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果与分析
2.1 T1代转基因烟草植株的遗传方式
2.2 T1代转基因烟草植株的PCR检测
2.3转基因烟草植株整合拷贝数及其与抗黑胫病的相关性
2.4 T0代、T1代转基因烟草植株抗病性的相关性分析
3讨论
3.1外源基因整合的拷贝数与其表达水平的关系
3.2转基因在烟草植株中的遗传特点
3.3转基因的复杂性和多样性
参考文献
附图
全文小结
附录A：本论文所用缩写词及中英文对照
附录B：主要化学试剂及缓冲液配制
附录C：常用培养基配方
附录D：常用的抗生素及使用浓度
附录E：常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器
