甜瓜枯萎病菌拮抗细菌在不同耕作土壤中的分布及其功能研究

摘要

从杭州菜园地、嘉兴大棚甜瓜田采集不同来源根际土壤和非根际土壤共14批(每批3份),利用平板稀释法和对峙法测定细菌、枯萎病菌数量及拮抗细菌的分布,结果显示,轮作后细菌总量明显增加,枯萎病菌数量降低,细菌和真菌比值(B/F值)增加,同时土壤中细菌数量越多,拮抗细菌的比例越高,尤其以大蒜与甜瓜轮作细菌数量最多,拮抗细菌比例也最高;细菌数量以菜园土壤中最高,甜瓜根际土壤次之,非根际土壤中数量最少.选取离体拮抗作用较好的9个拮抗菌株进行拮抗稳定性和抑菌谱测定,筛选出拮抗作用较稳定且抑菌谱宽的拮抗菌株7个,各菌株的培养滤液对菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用测定表明,它们均表现不同程度的抑菌活性,其中菌株Hc2和Hc3的抑制作用最强,培养滤液稀释50﹪时能完全抑制菌丝生长;凹玻片法测定拮抗细菌培养滤液与分生孢子悬浮混合后抑制孢子萌发率的结果表明,Ec50值越低,抑制力越强,Hc3菌株的培养滤液在5﹪时抑制率也达50﹪.对7株拮抗细菌处理盆载甜瓜种子后发现,Hc1,Hc2,Hc3和Jt6四个拮抗细菌表现较好的促生作用,其中菌株Hc2对芽和胚根的促生效果最好;Hc1、Hc3和Jt6则对幼苗的生长有一定的促进作用.在对甜瓜幼苗的防效试验中,4株拮抗细菌在处理后10天有很好的防效,相对防效最高可达65.4﹪,但是在处理后20天,防效显著降低.16个拮抗菌株的细菌学、Biolog和分子生物学(Rep-PCR)鉴定表明,阴性拮抗菌株大多数属于Pseudomonas spp.,是土壤中的优势菌株,部分属于Burkholderia spp.;Biolog鉴定相似性在0.50以上的种有P.aeruginosa;P.putida;P.resinovorans;P.fluorescensC,P.viridilividaA和Burkholderia cepacia.

目录

致谢

摘要

Abstract

前言

第一章文献综述

1生物防治土传植物病害的历史及现状

2影响根际微生物数量和种类的因素

2.1植物对根际微生物数量与种类的影响

2.2根系分泌物对根际微生物的影响

2.3根系分泌物与病原微生物的生态效应

3瓜类枯萎病防治研究现状

3.1抗病育种

3.2农业防治

3.3化学防治

3.4生物防治

4土传病害生防菌株基因工程菌的研究展望

5参考文献

第二章甜瓜枯萎病拮抗细菌的分布与不同耕作土壤的关系

前言

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1不同轮作处理的土壤中细菌和镰胞属真菌数量及拮抗细菌的分布

2.2不同耕作土壤中拮抗细菌的分布

2.3拮抗细菌拮抗作用大小

3 讨论

4参考文献

第三章甜瓜枯萎病拮抗细菌的生物学特性研究

前言

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果分析

2.1拮抗细菌的拮抗稳定性

2.2拮抗细菌抑菌谱

2.3拮抗细菌对甜瓜枯萎病菌菌丝生长的影响

2.4拮抗细菌对甜瓜枯萎病菌分生孢子萌发的影响

3讨论

4参考文献

第四章甜瓜枯萎病拮抗细菌的防病促生作用及其鉴定研究

前言

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1拮抗细菌对甜瓜种子发芽率及胚根伸长的影响

2.2拮抗细菌对甜瓜出苗率的影响

2.3拮抗细菌对甜瓜幼苗生长的影响

2.4拮抗细菌室内防效测定

2.5革兰氏染色及Biolog鉴定

2.2拮抗细菌的Rep-PCR分析

3讨论

4参考文献

总讨论

附录