鼠抗人CCR3抗体的制备以及对哮喘治疗作用的研究

摘要

过敏性哮喘是一种以气道慢性炎症、气道高反应性(AHR)、可逆性气道阻塞和粘液高分泌为特征的气道慢性疾病,病因复杂,发病机制尚不明确.近年来的研究显示,Eos是哮喘发病过程中主要的炎症细胞.过敏性哮喘发病时,抗原提呈细胞将抗原传递给T淋巴细胞并激活Th2细胞,后者释放炎症介质、细胞因子和趋化因子如白介素4(IL-4)、IL-5、Eotaxin等引起Eos在气道的募集和活化.Eos不仅可分泌血小板活化因子、白三烯等炎症因子,引起支气管平滑肌痉挛、气管微血管通透性增加、气道粘膜水肿等反应:激活的Eos还可释放嗜酸细胞阳离子蛋白、主碱基蛋白、嗜酸细胞神经毒素、嗜酸细胞过氧化酶等对上皮细胞产生直接而显著的细胞毒作用,使气道上皮细胞坏死脱落,基底层细胞暴露,神经末梢裸露,从而产生气道高反应性.在哮喘患者的血、痰、支气管肺泡灌洗液(BA[.F)中均可见Eos的升高. 趋化因子是一类结构相似、分子量约为8-10KD,具有趋化功能的重要的细胞因子,通过作用于靶细胞表面的趋化因子受体发挥生物学效应.根据半胱胺酸的相邻位置关系分为多个亚族.其中C-C亚族在气道炎症性疾病中有着重要的作用.Eotaxin属于CC类趋化因子,通过唯一的受体CCR3特异的强有力的诱导嗜酸性粒细胞向特定组织迁移.其对嗜酸性粒细胞具有高度的选择性,在趋化嗜酸性粒细胞参与哮喘气道炎症过程中具有重要的作用.CCR3(CC chemokine rceptor3)即CC趋化因子受体3,为一种受体蛋白,主要介导细胞对包括Eotaxin、Eotaxin-2、Eotaxin-3、RANTES、MCP-3、MCP-4以及MIP-1等多种趋化因子的反应并产生细胞迁移、活化等效应,其主要表达在嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞以及肥大细胞、TH2细胞、巨噬细胞上.Eotaxin等炎症介质通过CCR3激活Eos,吸引大量E0s迁移到气道,导致气道炎症和气道高反应性的产生,引起哮喘的发作.因此,切断该炎症通路的信号传导将抑制气道炎症的发生.抗CCR3抗体可与Eos表面的CCR3受体特异性结合,阻断IL-5、Eotaxin等炎症因子对Eos的作用,使Eos无法向气道聚集,避免了Eos对气道的破坏和哮喘的发病. 研究目的 1.合成CCR3细胞外区NH2端多肽并以此多肽免疫小鼠,制备鼠抗人抗CCR3抗体. 2.研究抗CCR3抗体对哮喘气道炎症和粘液高分泌的治疗作用. 研究方法 采用多肽合成仪经

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材料与方法

结果

讨论

参考文献

Eotaxin/CCR3与支气管哮喘

在读期间科研成果

致谢