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第1章绪论
1.1前言
1.2环境中的内分泌干扰物
1.2.1环境内分泌干扰物的定义
1.2.2环境内分泌干扰物的来源与分类
1.2.3环境内分泌干扰物的危害
1.2.4环境内分泌干扰物的作用机制
1.2.5环境内分泌干扰物的检测技术
1.3 日本青锵鱼在内分泌干扰研究中的应用
1.3.1鱼类应用于内分泌干扰研究的主要测试终点和敏感效应指标
1.3.2 日本青鲻鱼的主要生物学特性及其在内分泌干扰研究中的应用
1.4农药的内分泌干扰研究现状
1.4.1除草剂所引起的内分泌干扰现象
1.4.2杀虫剂所引起的内分泌干扰现象
1.4.3杀菌剂所引起的内分泌干扰现象
1.5手性及对映异构体
1.5.1手性的相关概念
1.5.2对映异构体的性质
1.5.3环境分析中对映异构体混合物的定量方法
1.6手性农药的内分泌干扰研究现状
1.7本课题的提出及研究内容
第1章参考文献
第2章o,p'-DDT的雌激素效应的对映体选择性
2.1前言
2.1.1手性持久性有机污染物
2.1.2典型手性持久性有机污染物o,p'-DDT
2.1.3本实验的成因及创新所在
2.2实验部分
2.2.1 o,p'-DDT对映体的制备及判定
2.2.2细胞系、细胞培养
2.2.3细胞增殖实验
2.2.4 RNA的提取及反转录
2.2.5荧光定量PCR
2.3结果与讨论
2.3.1对映体的制备及判定
2.3.2在E-SCREEN实验中的对映体选择性
2.3.3在MCF-7细胞中诱导pS2 mRNA表达的对映体选择性
2.3.4在MCF-7细胞中抑制ERα、ERβ mRNA表达的对映体选择性
2.4本章小结
第2章参考文献
第3章o,p'-DDT对乳腺肿瘤影响的对映体选择性
3.1前言
3.2实验部分
3.2.1人乳腺癌细胞系MCF-7的培养
3.2.2荧光定量RT-PCR
3.2.3细胞间黏附分析实验
3.3结果与讨论
3.3.1 o,p'-DDT对MCF-7细胞中侵润相关分子表达影响的对映体选择性
3.3.2 o,p'-DDT对MCF-7细胞-细胞黏附及其相关分子表达影响的对映体选择性
3.3.3 o,p'-DDT对MCF-7细胞中端粒酶催化亚基hTERT表达影响的对映体选择性
3.4本章小结
第3章参考文献
第4章o,p'-DDT对人胎盘发生过程影响的对映体选择性
4.1前言
4.2实验部分
4.2.1人绒毛膜癌细胞系JEG-3的培养
4.2.2荧光定量RT-PCR
4.2.3用ELISA试剂盒测定孕酮P4含量
4.3结果与讨论
4.3.1 o,p'-DDT对JEG-3细胞P4分泌和孕酮受体(PR)表达影响的对映体选择性
4.3.2 o,P'-DDT对JEG-3细胞中HILA-G表达的对映体选择性
4.3.3 o,p'-DDT对JEG-3细胞中GnRH-I和GnRHR-I表达的对映体选择性
4.4本章小结
第4章参考文献
第5章联苯菊酯在雌激素效应及吸收方面的对映体选择性
5.1前言
5.2实验部分
5.2.1联苯菊酯对映体的制备
5.2.2 MCF-7细胞增殖实验
5.2.3日本青鲻鱼肝脏内卵黄蛋白原水平的检测
5.2.4联苯菊酯对映体在日本青锵鱼体内的选择性吸收
5.3结果与讨论
5.3.1联苯菊酯对映体的拆分及制备
5.3.2联苯菊酯在体外E-SCREEN实验中的对映体选择性
5.3.3联苯菊酯在日本青锵鱼体内卵黄蛋白原酶联免疫实验中的对映体选择性
5.3.4联苯菊酯在日本青锵鱼体内吸收中的对映体选择性
5.4本章小结
第5章参考文献
第6章研究结果及未来工作展望
6.1研究结果
6.1.1两种手性农药o,p'-DDT和联苯菊酯对映体的拆分及判定
6.1.2 o,p'-DDT的慢性毒性效应的对映体选择性
6.1.3联苯菊酯在类雌激素效应及吸收方面的对映体选择性
6.2未来工作展望
6.2.1手性农药的内分泌干扰研究领域亟需加强
6.2.2不局限于雌激素效应,还应关注内分泌干扰的其它方面
6.2.3对实验现象进行总结,寻求普遍规律
致谢
攻读博士学位期间发表或录用的论文