人胎盘间充质样干细胞的分离、培养及其生物学特性分析

摘要

从组织块中分离纯化成体干细胞具有一定的困难，其他细胞的混杂成为获取高纯度组织干细胞的一个技术瓶颈。本文以人体胎盘为研究对象，在分散组织细胞的基础上，通过不同时间梯度贴壁方法分离纯化人胎盘间充质样干细胞，并与常规的直接贴壁方法比较，分析时间梯度贴壁方法分选细胞的增殖能力、多分化潜能以及免疫原性。研究结果表明，时间梯度贴壁法获得的细胞具有较强的增殖能力。直接贴壁法得到的细胞不具有分化潜能：而时间梯度贴壁法获得的细胞具有向成骨细胞和成脂肪细胞方向分化的能力。通过免疫原性基因检测分析，表明时间梯度贴壁法获得的细胞表达HLA-Ⅰ型即HLA-ABC，但不表达HLA-Ⅱ型即HLA-DR，通过表面抗原的测定也可以得到相同的结果，同时，通过与T淋巴细胞共培养的检测进一步确定了时间梯度贴壁法获得的细胞可以有效抑制异源T淋巴的增殖。本实验检验了时间梯度贴壁法获得的细胞具有低免疫原性．可以在今后的临床移植中得到更广泛的应用。

目录

文摘

英文文摘

致谢

1 前言

2 材料和方法

2.1 胎盘标本来源

2.2 实验试剂

2.3 实验仪器

2.4 实验试剂的配制

3 实验方法

3.1 细胞培养

3.2 细胞表面抗原分析

3.3 细胞免疫原性分析

3.4 细胞分化能力分析

3.4.1 定向分化

3.4.2 分化效应检测

3.5 基因表达分析

3.6 细胞生长动态

3.7 统计学处理

4 实验结果

4.1 细胞培养

4.2 细胞表面抗原分析

4.3 细胞免疫原性分析

4.4 细胞分化能力分析

4.4.1 成骨方向分化

4.4.2 成脂方向分化

4.5 细胞生长动态

5 讨论

参考文献

文献综述：胎盘间充质干细胞分离培养的研究进展

1 研究胎盘间充质干细胞的意义

2 胎盘间充质干细胞的分离方法与特性研究

3 胎盘间充质干细胞的研究前景及展望

4 参考文献

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