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大鼠弥漫性轴索损伤后髓鞘碎片聚积和清除

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摘要

1 引言

2 材料与方法

2.1 实验动物

2.2 实验试剂

2.3 实验器材

2.4 大鼠DAI模型制备

2.5 组织标本制备

2.6 油红O染液的制备

2.7 RO染色

2.7 图片观察和处理

2.8 统计处理

3 结果

3.1 RO染色结果

3.2 皮层组织中RO染色阳性颗粒数目变化

3.3 海马组织中RO染色阳性颗粒数目变化

3.4 脑干织中RO染色阳性颗粒数目变化

4 讨论

4.1 弥漫性轴索损伤及其继发性损伤

4.2 炎症反应与弥漫性轴索损伤

4.3 髓鞘碎片与弥漫性轴索损伤

5 结论

参考文献

综述 弥漫性轴索损伤机制研究进展

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摘要

目的:检测大鼠弥漫性轴索损伤后(diffuse axonal injury,DAI)髓鞘碎片在轴索损伤位点的堆积和清除。
  方法:雄性SD大鼠25只,随机分为实验组20只和对照组5只。实验组大鼠采用Marmarou方法制作大鼠DAI模型,分别于伤后1天、7天、14天和28天各取5只,断头取脑,制作冰冻切片,并采用油红O染色检测损伤位点的髓鞘碎片。对照组5只进行假手术操作而不打击,并采用同样的方法处理脑组织。显微镜下观察各切片,计数油红O染色阳性颗粒的个数。
  结果:对照组在皮层、海马及脑干内均未见明显RO染色阳性颗粒。实验组中,伤后1天,以上区域脑组织内仍未见明显阳性颗粒。在皮层组织内,伤后7天平均每200×图片内阳性颗粒的数目为48.00±16.70个;到14天时,增加至366.67±149.39个,与7天时相比具有显著性差异(p<0.01);至28天时,阳性颗粒数目降至25.67±7.02个,与7天时数目基本相当(与28天组比,p<0.01;与7天组比,p>0.05)。在海马组织内,伤后7天平均每200×图片内阳性颗粒的数目为11.67±3.06个;至14天时为23.33±4.16个,较7天组显著增加(p<0.01);至28天时,阳性颗粒基本消失,平均数目为2.00±1.00个(与7天组及14天组相比,均为p<0.01)。在脑干组织内,伤后7天平均每200×图片内阳性颗粒的数目为51.67±6.81个;14天时为23.67±4.93个,较7天时显著降低(p<0.01),28天时平均每200×图片内阳性颗粒的数目与14天时基本相当,为26.69±5.69个(与7天组比p<0.01,与14天组比p>0.05)。
  结论:DAI后在大鼠新皮层、海马及脑干组织中存在着髓鞘碎片长时间的聚积,可能通过其继发性反应影响DAI的预后。

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