铁皮石斛抗炭疽病种质资源筛选及抗性株系制种和应用

摘要

铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)，兰科石斛属，我国传统名贵中药材，有滋阴清热、润肺明目、抗癌防老等功效，市场需求日益增加，而野生资源已濒临灭绝，因此人工栽培面积逐年上升。2014年，全国人工种植面积突破50000多亩。随着设施栽培规模的扩大，铁皮石斛病虫害逐年严重。经调查，铁皮石斛叶部病害尤为严重，其中由胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起的叶片炭疽病更为普遍。为此本文对铁皮石斛的田间病害、抗性种源筛选及抗性株系制种和应用等方面进行了研究，具体结果如下:
　　1、铁皮石斛主产区病害调研，发现各基地的叶部病害多为炭疽病，主要症状表现为感染初期病叶的表面呈黑色针点状，随后病斑逐渐扩大，叶片中部呈淡褐色或灰白色，而边缘呈紫褐色或暗褐色的近圆形凹陷病斑，发病严重时整张叶片变枯黑最后脱落。
　　2、通过铁皮石斛炭疽病病害样本的采集和病原分离，以及形态学和分子生物学鉴定，鉴定出炭疽病的病原菌为胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）。
　　3、对本实验室选育的铁皮石斛ZJU系列株系，进行炭疽病抗病种源的筛选。获得了3个抗性较强的株系，分别为ZJU-1、ZJU-2和ZJU-4。
　　4、对高抗种源ZJU-4株系进行花器官发育分析，采用TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）染色法和联苯胺过-氧化氢法测定铁皮石斛不同花期的花药活力和柱头可授性。研究结果表明，花药与柱头发育不同步。开花8-14d的花药和开花8-21d柱头组合，座果率高达96.67％。
　　5、探索铁皮石斛原球茎(PLBs)诱导、增殖的培养条件。结果表明，原球茎的最佳诱导培养基为MS+6-BA1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+土豆100 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L，诱导率为19％;液体培养的最佳接种密度为1g/50ml，原球茎的增殖率高达108％。

目录

声明

论文说明

致谢

摘要

第一章 文献综述

1 铁皮石斛的资源及其分布情况

2 铁皮石斛的生物学特征

2．1 铁皮石斛的形态特征

2．2 铁皮石斛的生态习性

2．3 铁皮石斛的物候期特征

3 铁皮石斛的繁殖方式

3．1 铁皮石斛的自然繁殖

3．2 铁皮石斛的人工繁殖

4 铁皮石斛的病害

4．1 真菌病害

4．2 细菌病害

4．3 线虫病害

5 浙江省铁皮石斛产业发展状况

6 本文研究目的与意义

第二章 铁皮石斛抗炭疽病株系筛选

1 材料和方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 结果与分析

2．1 铁皮石斛主产区病害调查结果

2．2 病原菌的形态特征

2．3 病原菌的致病性测定

2．4 致病菌的形态学特征

2．5 致病菌的分子生物学鉴定

2．6 铁皮石斛株系的抗病性结果

3 讨论

第三章 基于花器官发育的铁皮石斛抗炭疽病种质的创制

1 材料和方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 结果与分析

2．1 开花动态的观察

2．2 花药活力的测定

2．3 柱头可授性的测定

2．4 花药活力和柱头可授性对座果率的影响

3 讨论

第四章 抗炭疽病铁皮石斛种苗产业化生产

1 材料和方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 结果与分析

2．1 不同添加物对原球茎诱导的影响

2．2 不同添加物和培养方式对原球茎增殖的影响

2．3 不同植物激素对铁皮石斛原球茎液体增殖的影响

2．4 接种密度对铁皮石斛原球茎增殖的影响

2．5 不同温度对铁皮石斛试管苗生长的影响

2．6 抗病新株系的产业化生产

2．7 扫描电镜观察铁皮石斛的原球茎

3 讨论

第五章 结论与展望

参考文献

作者简介