E3连接酶FBXW7对银屑病的调控作用及其机制研究

摘要

银屑病是由于皮肤局部在创伤、感染或细菌等条件下，造成免疫系统过度活化，引起慢性炎症反应，在各种促炎细胞因子的协同作用下，导致皮肤表皮层的角化细胞过度增殖，最终形成银屑。世界范围内，银屑病大约影响着3％的人群，由于银屑病发病于体表，对患者的工作生活带来巨大的影响。目前研究发现，由天然免疫细胞产生的白细胞介素23促使γδT细胞大量增殖并产生白细胞介素17是主要的发病机制之一。然而，在银屑病发病过程中，调控IL-23的机制尚不清楚。
　　E3泛素连接酶FBXW7作为一种抑癌基因，在肿瘤发生发展中的作用有比较全面的研究，但其在炎症中的功能并不清楚。本课题组前期研究发现FBXW7在病毒感染过程中通过介导SHP2的泛素化降解来稳定RIG-Ⅰ，促进Ⅰ型干扰素的产生。在各种炎症性自身免疫病模型中，FBXW7是否发挥作用，还有待探究。
　　在本课题中，我们利用髓系细胞中选择性敲除FBXW7(Lysm+FBXW7f/f)的小鼠，建立咪喹莫特(imiquimod，IMQ)软膏涂抹诱导的银屑病模型，研究了FBXW7对银屑病发生发展的调控作用，并初步揭示了其作用机制。通过去毛的背部及双耳的多次连续给予IMQ软膏涂抹构建小鼠银屑病模型，我们发现，与正常小鼠相比，小鼠耳朵和皮肤组织中FBXW7mRNA表达水平显著升高。髓系细胞中特异性敲除FBXW7之后，小鼠的银屑病症状显著减轻，皮损部位的γδT细胞的数量及IL-17细胞因子表达降低。体内外实验研究显示敲除FBXW7后，巨噬细胞和树突状细胞产生的IL-23水平下降。进一步研究发现，在FBXW7缺失的骨髓来源巨噬细胞(BMDM)中，具有转录抑制功能的组蛋白H3K9me3的水平在IL-23的启动子区有显著的升高。同时，我们发现FBXW7缺失的BMDM中H3K9me3特异性的甲基转移酶SUV39H2的表达升高。免疫共沉淀和免疫荧光实验显示FBXW7能够与SUV39H2结合。在FBXW7缺失的BMDM中SUV39H2的泛素化水平显著下降。因此我们的实验结果初步提示，FBXW7能够结合并泛素化降解H3K9me3特异性的甲基转移酶SUV39H2，导致IL-23的启动子区H3K9me3水平下降，从而促进IL-23的产生。
　　上述结果显示，FBXW7能够调控树突状细胞及巨噬细胞的IL-23细胞因子分泌，在小鼠银屑病模型发病过程中发挥重要的调控作用。我们的研究结果为揭示FBXW7对固有免疫和炎症性自身免疫病的调控作用增添了新的认识，为针对调控白细胞介素23的药物研发提供了潜在靶点和新的思路。

目录

声明

致谢

摘要

缩略词表

1 引言

2 材料和方法

2．1 实验材料

2．2 实验方法

3 实验结果

3．1 FBXW7在小鼠银屑病模型的组织中表达升高

3．2 髓系细胞中FBXW7缺失减轻了小鼠银屑病的严重程度

3．3 Lysm+FBXW7f/f小鼠的银屑病组织中IL-17及IL-22表达下降

3．4 FBXW7的缺失降低了巨噬细胞及树突状细胞分泌的IL-23

3．5 FBXW7降低巨噬细胞IL-23启动子区H3K9me3水平

3．6 FBXW7结合并泛素化降解甲基转移酶SUV39H2

4 讨论

5 小结

参考文献

综述

作者简介及在读期间取得的科研成果