microRNA--424在肝移植术后肝癌复发预测中的价值研究

摘要

肝细胞肝癌是全世界拥有高发病率与高死亡率的高度恶性肿瘤之一。并且，由于乙肝病毒感染的普遍流行以及社会人口老龄化问题的推进，我国新发肝癌病例占比超过全球的一半。理论上，肝脏移植手术可完全移除原发肝癌组织及潜在肝内转移灶，是目前最有效的治疗方法，但是实际研究显示在接受肝移植治疗的患者中，术后仍然有着较高几率的肿瘤复发情况，是影响患者长期生存最为主要的因素。因此，如何有效预测及预防移植术后肝癌复发问题已经成为临床实践的迫切需求。进一步筛选移植术后肿瘤复发精准预测标记分子，完善肝移植受体筛选标准、研发新型抗肿瘤复发靶向药，对进一步提高肝移植有效率、促进患者长期生存具有重要意义。 目的： MiR-424在众多恶性肿瘤包括肝细胞肝癌中出现异常表达情况。之前的研究已经表明miR-424在肝癌组织和肝癌细胞系中表达降低，并且在肝癌的发生发展中发挥了抑制肿瘤的作用。同时，有研究发现血清miR-424水平的降低与肝癌患者较差的预后有关，但miR-424在肝癌肝移植患者中的作用与机制尚无报道。本课题旨在借助体内外功能试验揭示miR-424在调控肝癌细胞多种恶性生物学行为中的作用，同时阐明miR-424作为生物学指标在预测移植术后肝癌复发中的潜在价值。 方法： 采用实时定量PCR对6种不同肝癌细胞株中miR-424的基础表达水平进行检测，同时对本研究中心121例肝癌肝移植患者的癌和癌旁样本进行检测，分析miR-424表达水平与临床参数和患者肿瘤复发之间的相关性。同时应用慢病毒载体转染技术，分别模拟miR-424表达缺失和过表达两种情况，进而从正反两方面来阐明miR-424在调控肝癌细胞生物学行为中的作用。 结果： 在6种肝癌细胞株中，HCC-LM3，Huh-7，SMMC-7721，HepG2和BEL-7402的miR-424表达水平显著低于L02细胞(p＜0.01)。相似的是，在121对肝癌患者组织样本中，相较于癌旁组织，肝癌组织样本中miR-424的表达水平明显受到抑制。除此之外，对比无肿瘤复发患者癌组织发现肝移植术后肿瘤复发患者的原发肝癌组织中miR-424表达水平出现极为显著的下降(p＜0.01)。Cox回归多因素分析证实miR-424表达下调是肝癌肝移植患者术后肿瘤复发的一个独立危险因素。那些不符合肝癌肝移植米兰标准且miR-424表达水平降低的患者倾向于更早发生移植术后肿瘤复发。此外，细胞功能实验证实miR-424过表达后具有抑制肝癌细胞增殖、侵袭转移、成瘤的作用，而敲减细胞中miR-424水平则展现出完全相反的恶性生物学行为调控作用。 结论： MiR-424参与调控移植术后肝癌复发进程，上调其表达水平可明显降低肿瘤细胞增殖、侵袭转移及体内成瘤等能力，并且有望成为移植后肝癌复发的精准预测分子及治疗新靶标。

目录

声明

致谢

摘要

中英文缩略词

1 引言

2材料与方法

2．1 材料

2．2 方法

2．3统计学分析

3 结果

3．1 miR-424在正常肝细胞系和不同肝癌细胞系中的表达情况

3．2 miR-424在肝癌与癌旁组织中的表达情况

3．3 肝癌组织中miR-424的表达与肿瘤临床病理因素的关系

3．4 miR-424表达变化对肝癌细胞活性的影响

3．5 miR-424表达变化对肝癌细胞体外迁移侵袭能力的影响

3．6外源性表达miR-424对Huh-7细胞裸鼠体内成瘤能力的影响

4 讨论

5 结论

参考文献

综述 MiR-424调控肿瘤发生发展的作用及其生物学机制研究进展

作者简历及在学期间所取得的科研成果