下咽壁咽缩肌的体外构建

摘要

在组织工程领域,聚乳酸和聚乙醇酸等具有较高生物相容性的聚合材料已广泛应用于体外生物构建。对下咽部组织来讲,骨骼肌是其功能的重要组成部分，其中的咽缩肌更是在吞咽和发音方面具有重要作用。但组织工程在下咽壁咽缩肌组织体外构建中的研究还处于起步和发展阶段。在本研究中,我们以具有微槽结构的高分子生物材料聚氨酯(PU)为支架，并与人骨骼肌卫星细胞复合培养，从而引导细胞沿着一定的方向有序排列。由于聚氨酯的低亲水性，我们在支架表面接枝丝素蛋白(PU-SF)和明胶(PU-Gel)来提高支架的亲水性从而改善其细胞粘附特性。支架的降解过程缓慢，同时发现，经表面改性的支架材料其机械性能也有所提升。经丝素蛋白表面改性的支架上，细胞的增殖速率和分化情况比未接枝和接枝明胶的支架上好。我们的研究结果表明，聚氨酯支架与骨骼肌卫星细胞复合培养为咽缩肌的重建带来新的希望。

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引言

1研究内容和技术路线

1.1 研究内容

1.2 技术路线

2 材料和方法

2.1实验试剂与耗材

2.2实验仪器

2.3透析袋的处理

2.4丝素蛋白（Silk fibroin, SF）的提取

2.5支架的制备及处理

2.6支架的性能检测

2.7细胞培养

2.8骨骼肌卫星细胞生长速率测定

2.9免疫荧光检测

2.10扫描电镜分析

2.11 Western blotting

2.12统计分析

+3 实验结果

3.1支架的机械性能

3.2 支架的降解率

3.3支架拉伸应力的变化趋势

3.4细胞在平面与带微槽支架上的排列方式

3.5不同支架上骨骼肌卫星细胞的生长曲线

3.6细胞在带微槽支架上的生长

3.7免疫荧光观察细胞在不同表面改性支架上的生长

3.8 Western blotting观察细胞在不同表面改性支架上的分化

4讨论

5结论

参考文献

附录A 主要试剂配制

附录B 中英文词对照

附录C 综述

在学研究成果

致谢