寻常型银屑病患者血清锌与SOD、IL-2及TNF-α相关性的研究

摘要

目的：本实验通过研究寻常型银屑病患者各期(进展期、稳定期、消退期)与对照组血清Zn(锌)的变化情况，Zn与PASI评分(银屑病皮疹面积和严重程度评分法)的关系，Zn与SOD(超氧化物岐化酶)的关系，以及Zn与IL-2(白介素-2)及TNF-a(肿瘤坏死因子-a)的关系，来探讨Zn和银屑病的关系，从而进一步探讨银屑病的病因和发病机制。 方法：选择40例寻常型银屑病患者和30例正常人分别作为观察组和对照组。分别抽取银屑病患者进展期、稳定期、消退期和正常人上午8～9时空腹时的外周血和无名指血。 ①对银屑病患者各期在每次抽血前分别行PASI评分。 ②用BH5100型原子吸收光谱仪利用Zn的特征性谱线光强大小，根据朗伯-比耳定律，检测Zn的含量。先打开仪器电源开关，调控参数，将其能量值设为100～110之间，预热30分钟，依次用“0”、“1”、“2”、“3”号液定标，得出标准曲线，使其相关系数在0.999以上，依次测量各样品，得出结果 ③用黄嘌呤氧化酶法通过SOD对超氧阴离子自由基的专一性抑制作用，测出血清总SOD的活力。按照说明书配好试剂一至六，测定管和对照管分别加入试剂-1.0ml，试剂二、三、四各0.1ml，测定管加入样品0.03ml,对照管加入等量的蒸馏水，混匀，置于37℃恒温水浴40分钟，加入显色剂2ml，室温放置10分钟，调整分光光度计于550nm处，用蒸馏水调零比色。 ④采用双抗夹心ELISA法检测IL-2。用抗人IL-2单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的IL-2与单抗结合，游离成分被洗去，加入生物素化的抗人IL-2抗体和辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲和素特异性结合。抗人IL-2抗体与结合在单抗上的人IL-2结合形成免疫复合物，游离成分被洗去，加入显色剂，若反应孔有IL-2，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂显蓝色，加终止液变黄。在450nm处测OD值，IL-2浓度与OD值成正比，通过绘制标准曲线求出标本的IL-2浓度。 ⑤TNF-a的检测同IL-2。 结果： ①银屑病患者在各期中血清Zn较正常人显著降低，各组间有显著性差异(F=108.35，P<0.01)，随着银屑病患者病情的好转血清Zn有逐渐降低的趋势。其血清Zn关系为：健康人(137.26±13.47μmol/l)>进展期(116.91±16.66μmol/l)>稳定期(97.31±9.17μmol/l)>消退期(88.54±7.93μmol/l)。银屑病患者在各期中血清Zn与PASI评分呈正相关(各期相关系数R=0.641、0.749、0.717，P<0.01)，随着PASI评分的降低Zn逐渐降低。 ②银屑病患者存在着SOD的紊乱，在病程各期中SOD较正常人显著降低，各组间有显著性差异(F=85.53，P<0.01)，银屑病患者在病情的恢复过程中SOD逐渐上升，但仍低于正常。其血清SOD关系为：进展期(42.40±5.46 U/ml)<稳定期(49.97±7.08 U/ml)<消退期(59.83±7.90 U/ml)<对照组(72.98±12.68U/ml)。银屑病患者在各期中SOD与PASI评分呈负相关(各期相关系数分别为：R=-0.815、-0.834、-0.730，P<0.01)，随着PASI评分的逐渐降低，SOD逐渐上升，即随着PASI评分的降低，SOD逐渐恢复正常。银屑病患者在各期中Zn与SOD呈负相关(各期相关系数分别为：R=-0.443、-0.710、-0.604，P<0.01)，即随着血清Zn的逐渐降低，SOD反而上升。而在正常人血清Zn与SOD呈正相关(R=0.534，P<0.01)。 ③银屑病患者在各期中IL-2较正常人显著升高，各组间有显著性差异(F=133.65，P<0.01)，随着病情的恢复，IL-2逐渐恢复正常，但仍高于对照组。各期IL-2关系为：进展期(44.16±6.44pg/ml)>稳定期(34.77±6.14 pg/ml)>消退期(26.31±3.46 pg/ml)>对照组(21.75±3.32 pg/ml)。银屑病患者在各期中IL-2与PASI评分呈正相关(各期相关系数为：R=0.779、0.872、0.818，P<0.01)，随着PASI评分的逐渐降低(银屑病病情的好转)，IL-2逐渐降低。对照组和银屑病患者在各期中Zn与IL-2均呈正相关(相关系数分别为：R=0.661，0.542、0.567、0.554，P<0.01)，随着血清Zn的逐渐降低，IL-2逐渐降低。 ④银屑病患者在各期中TNF-a较正常人显著升高，各组间有显著性差异(F=98.98,P<0.01)，随着病情的恢复，TNF-a逐渐降低，但仍高于对照组。各期TNF-a关系为：进展期(25.65±4.54pg/ml)>稳定期(20.51±3.12pg/ml)>消退期(16.49±1.90 pg/ml)>对照组(14.09±1.26 pg/ml)。银屑病患者在各期中TNF-a与PASI评分呈正相关(各期相关系数R=0.779、0.845、0.788,P<0.01．)，随着PASI评分的逐渐降低，TNF-a逐渐降低。对照组和银屑病患者在各期中Zn与TNF-a评分均呈正相关(相关系数分别为：R=0.724，0.539、0.722、0.617,P<0.01)，随着血清Zn的逐渐降低，TNF-a逐渐降低。 结论： ①银屑病患者在病程中各期血清Zn呈进行性下降，血清Zn均较正常人明显降低，各组间有显著性差异(P<0.01)。其血清Zn关系为：对照组>进展期>稳定期>消退期。银屑病患者在病程的各期中血清Zn与PASI评分呈正相关。提示Zn可能通过多种途径参与银屑病的病理生理过程；银屑病患者在病程的各期中PASI评分越高，消耗的Zn就越多，Zn降低就更明显。 ②银屑病患者在病程的各期中SOD逐渐上升，但均较正常人显著降低，各组间有显著性差异(P<0.01)。其血清SOD值关系为：进展期<稳定期<消退期<对照组。银屑病患者血清Zn与SOD呈负相关，但在对照组Zn与SOD呈正相关(P<0.01)。提示银屑病患者存在着SOD的紊乱，随着病情的恢复，SOD逐渐升高；缺Zn是银屑病患者SOD降低的原因之一，但不是主要原因，银屑病患者还存在着其他因素影响SOD的变化。 ③银屑病患者在病程的各期中IL-2、TNF-a均较正常人显著升高，各组间有显著性差异(P<0.01)。随着病情的恢复，IL-2、TNF-a逐渐降低，但仍高于对照组。各期IL-2、TNF-a关系为：进展期>稳定期>消退期>对照组。银屑病患者各期和对照组Zn与IL-2、TNF-a呈正相关。提示Zn可能通过调节IL-2、TNF-a，来抑制Th1细胞，从而对银屑病的病理生理过程产生影响。

目录

论文说明：英汉缩略词对照表

声明

摘要

前言

材料与方法

结果

附图：银屑病患者与对照组Zn、SOD、IL-2、INF-a值

讨论

结论

参考文献

致谢

银屑病与微量元素