宁波地区野生换锦花的遗传多样性及其生物碱加兰他敏含量研究

摘要

换锦花（Lycoris sprengeri）为石蒜科（Amaryllidaceae）石蒜属（Lycoris）植物，具有极好的观赏价值和极高的药用价值。为了保护野生植物资源，合理开发和利用宁波地区的野生换锦花，对换锦花种子的生物学特性和贮藏特性，6个地区野生换锦花鳞茎中主要成分的含量以及6个地区野生换锦花居群的遗传多样性水平和遗传结构进行了研究。
　　本研究主要内容包括：⑴以换锦花种子为实验材料，观察了种子的形态特征及测定了种子的千粒重、含水量、种子生活力、发芽特性等种子的生物学特性，并对其种子贮藏的最佳条件进行了研究。结果表明：换锦花果实为蒴果，种子大小差异较大，种子长度为3.14mm～7.16mm；宽度为3.08mm～7.08mm；厚度为2.12mm～6.20mm。种子多数为桔瓣形，约占62％；少数为球形。鲜种子千粒重为180.1g，平均含水量为64.86%，平均生活力为83.33%。4℃湿沙、4℃和-80℃冰箱中贮藏都可以保持种子的生活力。⑵以采自舟山大猫岛及宁波市北仑洋涨岙、奉化萧王庙、象山鹤浦、镇海招宝山、慈溪海黄山等6个地区的野生换锦花鳞茎为实验材料，以石蒜碱计总生物碱的含量，采用分光光度法测定其总黄酮、非淀粉粗多糖及总生物碱的含量；采用 HPLC法测定其加兰他敏的含量。实验结果表明，6个地区的野生换锦花鳞茎中主要成分的含量存在一定的差异。不同地区的野生换锦花鳞茎中的总黄酮、总生物碱、加兰他敏的含量及非淀粉粗多糖的得率变化幅度分别为1.095mg·g-1～1.751 mg·g-1、2.691 mg·g-1～5.559 mg·g-1、0.686mg·g-1～1.476 mg·g-1和11.590%～14.182%。其中采自象山鹤浦的总黄酮含量最高，为（1.751±0.116） mg·g-1；慈溪海黄山的非淀粉粗多糖的得率最高，为（14.182±0.523）%；镇海招宝山的总生物碱的含量最高，为（5.559±0.394） mg·g-1；北仑洋涨岙的加兰他敏的含量最高，为（1.476±0.018）mg·g-1。同一地区的总生物碱与加兰他敏的含量呈一定的正相关，相关系数为0.601，但并不显著。⑶采用ISSR分子标记技术，对宁波6个地区的野生换锦花居群的遗传多样性水平和遗传结构进行分析。10个ISSR引物共扩增出74个条带，其中多态性条带67个，多态性位点百分比（PPL）为90.54%。野生换锦花在物种水平上的遗传多样性很高，多态位点百分比（PPL）为90.54%，Nei’s基因多样性（H）为0.2700，Shannon’s指数（I）为0.4144；在居群水平上的遗传多样性较低，多态位点百分比（PPL）平均值为76.35%，Nei’s基因多样性（H）平均值为0.2517，Shannon’s指数（I）平均值为0.3800。Nei’s基因分化系数 Gst为0.0679，基因流 Nm为6.8654，AMOVA分子变异分析结果表明在总的遗传变异中，有95.85%的变异发生在居群内，仅有4.15%的变异发生在居群间，居群间较高的基因流水平可能是居群间遗传分化程度很低的主要原因。UPGMA聚类结果表明6个居群间的亲缘关系较近，6个换锦花居群可分为两大类群，即北仑、慈溪和象山3个居群聚成一类；奉化、镇海和舟山3个居群聚成另一类。Mantel检验的结果表明，居群间的地理距离和遗传距离之间没有显著相关性。

目录

声明

引言

1研究综述

1.1换锦花的生物学特征及资源分布

1.2换锦花的繁殖技术研究进展

1.3换锦花鳞茎成分研究进展

1.4 ISSR分子标记技术及其在石蒜属植物遗传多样性研究中的应用

1.5研究的目的和意义

2.1材料和方法

2.2结果与分析

2.3小结

3.1材料与仪器

3.2实验方法

3.3结果与分析

3.4小结

4.1材料和方法

4.2结果与分析

4.3小结

5结论

5.1换锦花种子的生物学特性和贮藏特性研究

5.2换锦花鳞茎主要成分含量的研究

5.3换锦花遗传多样性的研究

参考文献

在 学 研 究 成 果

致谢