目的:检测信号转导与转录激活因子5a(Signal transducer and activatorof transcription5a,STAT5a)和信号转导与转录激活因子5b(Signaltransducer and activator of transcription5b,STAT5b)在非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)组织和正常肺组织中的表达,初步探讨它们在NSCLC的发生、侵袭和转移中的作用。方法:利用免疫组织化学SP法检测40例NSCLC组织和20例正常肺组织中STAT5a蛋白与STAT5b蛋白表达水平。NSCLC组织均为手术切除获得,术前未作任何放疗或化疗。其中,男性29例,女性11例；年龄为35—78岁,<60岁者22例,≥60岁者18例；鳞癌26例,腺癌14例；肿瘤直径≤3cm者14例,>3cm者26例；有淋巴结转移者18例,无淋巴结转移者22例；Ⅰ-Ⅱ期者24例,Ⅲ-Ⅳ期者16例；高一中分化者30例,低分化者10例。标本组织经福尔马林固定,石蜡包埋,4μm厚连续切片,切片常规脱蜡水化后,蒸馏水冲洗,磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline,PBS)浸泡,高温抗原修复,3％H2O2阻断内源性过氧化物酶活性,并用正常山羊血清封闭交叉反应。滴加一抗(STAT5a兔抗人多克隆抗体,STAT5b兔抗人多克隆抗体)孵育,PBS冲洗后滴加生物素标记二抗孵育,PBS冲洗后滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液(S-A/HRP)孵育,PBS冲洗,DAB显色,苏木素复染,透明,封片观察。以胞质或胞核内出现棕黄色颗粒、网织状或棕褐色团块为阳性细胞。其中,STAT5a蛋白及STAT5b蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞质,少数位于细胞核；按每张切片的阳性细胞比例及着色深浅划分-、+、++、+++四级,基本不着色或着色细胞少于5％为阴性(一),着色浅淡或着色细胞占5％-25％为弱阳性(+),着色适中或着色细胞占26％-50％为中度阳性(++),着色深或着色细胞大于50％为强阳性(+++)。结果:(1)STAT5a及STAT5b蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),在肿瘤中的表达高于正常肺组织；(2)STAT5a及STAT5b蛋白在NSCLC组织中的表达与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度及类型、淋巴结转移及TNM分期无关(P>0.05)；但是STAT5b蛋白表达与性别相关(p<0.05),其女性患者表达高于男性患者(p<0.05),而STAT5a蛋白表达与性别无关(p>0.05)。(3)STAT5a及STAT5b蛋白在NSCLC组织中的表达无相关性(p>0.05),而STAT5a蛋白在NSCLC中关系比STAT5b蛋白密切。结论:(1)STAT5a及STAT5b蛋白在NSCLC中的表达增高,显著高于正常肺组织。(2)STAT5a蛋白及STAT5b蛋白与NSCLC中的表达与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度及类型、淋巴结转移和TNM分期无关,提示它们可能只在肿瘤发生过程中发挥作用,而与肿瘤进展、侵袭和转移无关。但是STAT5b蛋白表达与患者的性别上有相关性(p<0.05),其在女性患者的表达高于男性患者,而STAT5a蛋白与患者的性别上无关(p>0.05)。(3)STAT5a蛋白与及STAT5b蛋白在NSCLC中的表达无相关性,说明它们在促进细胞转化,导致肿瘤的发生过程可能是各自独立发挥作用的,无协同作用,而STAT5a在NSCLC中关系比STAT5b密切。
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