PTEN、Ki-67、CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中的表达及意义

摘要

背景与目的：皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma，SCC)是发生在表皮或粘膜上皮细胞的显示不同程度鳞状上皮分化的较常见的恶性肿瘤，居皮肤恶性肿瘤的第二位[1]。研究证明：该肿瘤的形成与发展是在外因与内因作用下多步骤渐进、综合作用的结果。其中癌细胞的凋亡、癌基因的激活与抑癌基因的失活有重要的作用，对细胞增殖分裂的调控失常是肿瘤发生的重要本质之一[2]。近年来，癌基因及抑癌基因在肿瘤发生、发展中的作用已成为研究热点。本研究旨通过免疫组化方法观察分析PTEN、Ki-67、CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其相互关系，探讨PTEN、Ki-67、CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌发生发展中的作用及意义，提供皮肤鳞状细胞癌病因及发病机制研究的理论基础。
　　方法：采用免疫组织化学技术检测PTEN、Ki-67、CyclinD1在30例皮肤鳞状细胞癌石蜡包埋组织、15例正常皮肤组织中的表达，对所有标本行PTEN、Ki-67、CyclinD1免疫组化En Vision法染色。采用BH-2型OLYMPUS光学显微镜随机检测4个独立高倍视野(×200)，根据阳性肿瘤细胞染色程度或所占百分比，判断为无表达(-)：无或极少量细胞着色，表达<5％以下；低表达(+)：呈淡黄色或阳性细胞数5％～29％；中度表达(++)：呈黄色或阳性细胞数30％～59％；高表达(+++)：呈棕黄色或阳性细胞数≥60％。PTEN、Ki-67于细胞核内出现黄色或棕黄色反应物颗粒为阳性。CyclinD1于细胞核及胞浆内出现黄色或棕黄色反应物颗粒为阳性。应用SPSS16.0统计软件作统计分析，对阳性率的差异显著性用x2检验，两两之间的相关性采用Spearman秩相关系数分析。
　　结果：1.PTEN在皮肤鳞状细胞癌组织中阳性表达率为96.7％，与正常组织中阳性率100％相比较，无统计学意义(x2=0.511，P>0.05)，但主要以弱阳性和阳性表达为主，而强阳性表达率为43.33％，低于正常皮肤组织中的强阳性表达率86.67％，其差异有统计学意义(x2=7.95，P<0.05)；PTEN在皮肤鳞状细胞癌组织各分级间表达强度以强阳性计算，结果为Ⅰ级66.67％、Ⅱ级35.71％、Ⅲ级0％，随着分级越高，表达率越低，但经统计分析，其差异无统计学意义(x2=8.565，P>0.05)。2.Ki-67在皮肤鳞状细胞癌组织中阳性表达率为83.33％，明显高于正常皮肤组织中的阳性表达率13.33％，其差异有统计学意义(x2=20.607，P<0.01)；Ki-67在皮肤鳞状细胞癌组织各分级间表达强度结果为Ⅰ级66.67％、Ⅱ级92.86％、Ⅲ级100％，随着分级越高，表达率越高，其差异有统计学意义(x2=15.476，P<0.01)。3.CyclinD1在皮肤鳞癌组织中阳性表达率为70％，明显高于正常皮肤组织中的阳性表达率13.33％，其差异有统计学意义(x2=13.453，P<0.01)；CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌组织各分级间表达强度结果为Ⅰ级41.67％、Ⅱ级85.71％、Ⅲ级100％，随着分级越高，表达率越高，其差异有统计学意义(x2=11.517，P<0.05)。4.三者中两两之间的相关性经统计分析，PTEN与Ki-67在皮肤鳞状细胞癌中表达呈负相关，(r=-0.411，P<0.05)；PTEN与CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中表达呈负相关(r=-0.386，P<0.05)；Ki-67和CyclinD1之间在皮肤鳞状细胞癌中表达呈正相关(r=0.623，P<0.01)。
　　结论：1.PTEN在皮肤鳞状细胞癌中阳性表达率与正常对照组差异不明显，提示可能与皮肤鳞状细胞癌较其它器官恶性肿瘤恶性程度低、发展慢、预后好有关，而强阳性表达较正常对照组明显降低，表明该蛋白基因在抑制皮肤鳞状细胞癌的发生发展中仍存在一定相关性，但与该肿瘤恶性分化程度的关系尚不明确，PTEN可能不参与皮肤鳞状细胞癌的分化。2.Ki-67在皮肤鳞状细胞癌中阳性表达上调，在正常皮肤组织中不表达或低表达，提示Ki-67与皮肤鳞状细胞癌的增殖分化相关，可能将作为判定该肿瘤细胞恶性增殖程度和分化程度的指标之一。3.CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中阳性表达上调，与该肿瘤恶性程度呈正相关，其异常表达可能与皮肤鳞状细胞癌的发生、发展机理有关，并有可能作为皮肤鳞状细胞癌分化和预后的评价指标之一。4。PTEN与Ki-67在皮肤鳞状细胞癌中表达呈负相关，表明它们在皮肤鳞状细胞癌的分化增殖中存在一定的相互关系，联合检测PTEN和Ki-67，对于临床判断皮肤鳞状细胞癌的恶性程度，判断预后，可能有重要的指导意义和临床价值。5.PTEN与CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中表达呈负相关，提示他们在皮肤鳞状细胞癌的细胞有丝分裂周期调控中存在一定的相互关系。联合二者同时检测，有可能作为判断皮肤鳞状细胞癌恶性程度和预后的一个辅助指标。6.Ki-67和CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中表达呈正相关，表明二者在皮肤鳞状细胞癌的周期调控、分化增殖中存在一定相关性，同时检测Ki-67和CyclinD1，结合病理形态学特征，可能会提高诊断皮肤鳞状细胞癌的准确率。