孕马尿中结合雌激素含量测定及其随孕期变化趋势研究

摘要

目的： 建立孕马尿(Pregnant Mare Urine,PMU)中结合雌激素（Conjugated Estrogen,CE)成分的HPLC（High Performance LiquidChromatography）含量测定方法,指导CE 原料药质量控制；定期测定孕马不同孕期尿液中CE含量，掌握孕马尿雌激素分泌规律，比较不同品种，不同年龄，不同地区孕马尿中CE含量，为孕马尿采集管理规范提供科学依据。方法：1）采用HPLC 同时测定孕马尿中雌酮硫酸钠（Sodium EstroneSulfate,ESS）、马烯雌酮硫酸钠(Sodium Equilin Sulfate,EQS)和17a-双氢马烯雌酮硫酸钠（Sodium 17a-Dihydroequilin Sulfate，17a-DHEQS)的含量。2）孕马怀孕5 月至产驹连续采集40 匹个体孕马尿和1500 匹孕马混合尿,分析尿液中CE含量与孕马孕期、年龄、品种、生长环境等因素的关系。结果： 1）经方法学验证，所确定的孕马尿中CE含量测定方法专属性强，准确可靠，可有效控制孕马尿的质量。2）孕马怀孕22 周左右尿液中CE含量最高,此后逐渐下降，到产驹前后降至最低值；孕马怀孕20 周尿液中17a-DHEQS和EQS含量较低，随着怀孕延长逐渐升高，32 周左右达到最高水平，怀孕后期逐渐下降。怀孕22 周左右尿液中ESS含量较高，此后逐渐降低。哈萨克马与伊犁马在怀孕5–10 月尿液中CE含量没有差异（P>0.05）；不同年龄孕马尿中CE含量差异没有统计学意义（P>0.05）；新源县不同地区孕马尿中CE含量差异有统计学意义（P<0.05），其中南部地区孕马尿中CE含量比东、西部地区孕马尿CE含量高；群体与个体孕马尿中CE含量变化趋势一致。结论：本课题所建立的孕马尿中CE含量HPLC检测方法准确、可靠，重现性好，可作为结合雌激素原料药质量控制标准；2）怀孕早期尿液中CE含量较低，怀孕中期达到最高值，然后逐渐下降。

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参考文献

天然雌激素来源-孕马尿研究进展

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