携尿激酶及RGDS靶向溶栓超声微泡造影剂制备的实验研究

摘要

目的：研究制备携带尿激酶（UK）及精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸－丝氨酸（RGDS）肽段靶向溶栓超声微泡造影剂的可行性，并评价其理化性质及所携带尿激酶的活性。方法：尿激酶和RGDS进行荧光双标记，根据尿激酶/RGDS 1:1、2:1和1:2不同比例实验分为三组，以声诺维（SonoVue）为载体，通过直接连接法，制备亲血栓同时携带溶栓药物的超声微泡造影剂，并检测三组微泡大小、形态、荧光亮度，微泡与尿激酶及RGDS的结合率以及所携带尿激酶的活性。结果：声诺维、尿激酶及RGDS三者可以稳定结合，以尿激酶和RGDS呈1:1比例配制的最佳。配制的造影剂在荧光显微镜下观察，洗涤前、后微泡表面均可发出绿色及橙红色荧光；流式细胞仪定量检测结果显示，洗涤前、后尿激酶携带率分别为73.4±11.0%、72.3±9.4%，RGDS携带率分别为67.1±10.9%、64.6±10.2%；体外血栓溶解实验证实所制备造影剂中尿激酶具有活性（p<0.01），血栓溶解率为18.4±3.2%。结论：使用声诺维通过直接连接法可以制备同时携带尿激酶及RGDS的靶向溶栓超声微泡造影剂。

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