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维药罗勒有效提取物在体外对细胞内花生四烯酸代谢途径的影响

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前言

材料与方法

1 材料

2 方法

结果

1. 黄酮含量及抗氧化活性的测定

2 MTT法绘制RAW264.7细胞的生长曲线

讨论

1 维药罗勒不同提取物中黄酮含量及抗氧化活性的测定

2 MTT 法确定给药浓度

3 罗勒有效提取物在体外对花生四烯酸代谢途径的影响

小结

致谢

参考文献

综述:中草药及其有效成分抗炎作用机制研究概述

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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摘要

目的:通过体外实验,研究维药罗勒(Ocimum basilicum L.OBL)有效提取物对花生四烯酸代谢途径的影响,从而进一步说明其抗炎作用机制。
  方法:①采用紫外分光光度法测定 OBL-乙酸乙酯和OBL-正丁醇中总黄酮的含量;检测 OBL-乙酸乙酯和OBL-正丁醇对 DPPH·的清除作用。②采用 MTT比色法检测罗勒有效提取物对RAW264.7细胞的毒性作用,并求出其IC50值,筛选出给药剂量。③将用OBL-乙酸乙酯和OBL-正丁醇依次对LPS处理的RAW264.7细胞进行干预,采用ELISA法测定并比较上清液中LTB4和PGE2的浓度,求出其抑制率。
  结果:①OBL-乙酸乙酯和OBL-正丁醇中总黄酮含量分别为21.0233μg/ml(RSD0.19% n=5),4.7829μg/ml(RSD0.58% n=5);0.5mg/ml OBL-乙酸乙酯和OBL-正丁醇在体外对DPPH·的清除率分别为88.8%,72.2%。②OBL-乙酸乙酯和OBL-正丁醇提取物对RAW264.7细胞的生长有不同程度的影响,24h的IC50值分别为312.5μg/ml、350.9μg/ml,其抑制作用具有浓度依赖性;给药时间为24h时,OBL-乙酸乙酯和OBL-正丁醇提取物对RAW264.7细胞的最大给药浓度均为100μg/ml。③OBL-乙酸乙酯和OBL-正丁醇提取物对LTB4和PGE2均有不同程度的抑制作用,对LTB4的最大抑制率分别为42.78%、38.63%,对PGE2的最大有抑制率分别为57.95%、51.0%;对LTB4和PGE2的抑制作用中OBL-乙酸乙酯的强于OBL-正丁醇(P<0.05);相同浓度的药物对PGE2的抑制率大于LTB4(P<0.05);
  结论:①维药罗勒有效提取物中所含的黄酮可能是其发挥抗炎作用的有效化学成分,且其体外抗氧化活性也在一定程度上体现其体外抗炎活性。②维药罗勒可能是一种双重抑制药,它通过抑制环氧合酶-2和5-酯氧化酶的活性而发挥抗炎作用,OBL-乙酸乙酯提取物是维药罗勒的抗炎活性部位。

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