超顺磁性氧化铁纳米粒子标记羊骨髓间充质干细胞的体外实验研究

摘要

目的:探究超顺磁性氧化铁纳米粒子体外标记羊骨髓间充质干细胞的最佳方案，进行磁共振扫描，观察标记细胞与三维打印组织工程骨支架复合培养的效果。
　　方法:取磁共振造影剂超顺磁性氧化铁纳米粒子与多聚左旋赖氨酸的复合物标记第3代羊骨髓间充干细胞，将两者（各μg/mL）按配比分为四组，A组:25∶0.75、B组:50∶1.5、C组:100∶3和D组:200∶6，设未标记细胞为对照组，分别在4h、24h和48h应用普鲁士蓝染色检测细胞标记阳性率、台盼蓝染色检测细胞存活率以及MTT实验检测细胞增殖活力，选择最佳标记组细胞，以3.0T磁共振评价不同浓度标记细胞的成像效果。通过透射电子显微镜观察细胞内外粒子分布并与三维打印组织工程骨支架复合培养。
　　结果:A组、B组细胞标记24h和48h普鲁士蓝染色阳性率最高，均达100％，细胞外未见纳米粒子聚集块形成;A组细胞标记4h、24h细胞存活率最高，与对照组差异无统计学意义（P＞0.05）;4组纳米粒子标记不同时间均未影响细胞增殖活力;在3.0T磁共振成像下至少可检测到A组5×103个细胞;透射电子显微镜下可见纳米粒子分布于胞浆内、扫描电镜下观察可见标记后细胞与三维打印组织工程骨支架有效粘附。
　　结论:超顺磁性氧化铁纳米粒子与多聚左旋赖氨酸配比为25∶0.75（μg/mL）时，标记第3代羊骨髓间充质干细胞24h为最佳方案，可粘附于三维打印组织工程骨支架表面。

目录

声明

中英文缩略词对照表

摘要

前言

研究内容与方法

1 研究对象

1．1 主要试剂、耗材和仪器

2 内容与方法

2．1 新疆阿勒泰大尾羊骨髓间充质干细胞的提取、培养与传代备用

2．2 SPIO-PLL复合物标记细胞

2．3 普鲁士蓝染色

2．4 细胞活率测定

2．5 MTT检测细胞增殖能力

2．6 3．0T MR成像

2．7 透射电子显微镜观察

2．8 SPIO-PLL标记羊BMSCSs与三维打印组织工程骨支架复合培养

3 质量控制

4 统计学分析

5 技术路线图

结果

讨论

小结

致谢

参考文献

综述 超顺磁性氧化铁颗粒示踪骨髓间充质干细胞骨修复能力和治疗作用的研究进展

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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