维医异常黑胆质型消化系统肿瘤患者外周血共性miRNA标记物的研究

摘要

目的:在miRNA表达谱芯片结果的基础上，进一步确定异常黑胆质型消化系统肿瘤外周血共性miRNA标志物，为实现传统民族医学的现代化和标准化做一份贡献。
　　方法:收集异常黑胆质型消化系统肿瘤患者外周血60例，非异常黑胆质型消化系统肿瘤患者外周血64例，健康志愿者外周血21例，从白细胞分离RNA。小样品通过miRNA表达谱芯片，筛选异常黑胆质型消化系统肿瘤差异表达候选miRNA。其中选取7种候选miRNA，设计序列特异性引物，利用荧光定量PCR方法检测，经统计学分析，确定异常黑胆质型消化系统肿瘤外周血共性miRNA标志物。
　　结果:通过miRNA表达谱芯片分析，筛选23种上调表达和12种下调表达的异常黑胆质型消化系统肿瘤患者外周血共性miRNA标记物。本实验选择6个上调和1个下调的异常黑胆质型消化系统肿瘤患者外周血共性miRNA。利用荧光定量PCR方法，定量检测表达水平。与正常组比较，在异常黑胆质型消化系统肿瘤组的表达量最高，在非异常黑胆质型消化系统肿瘤组表达量降低，除了miR-31-3p，其他6个miRNA的表达水平与miRNA表达谱芯片结果一致。与正常组比较，在异常黑胆质型消化系统肿瘤组中miR-4725-5p，miR-4731-3p，miR-4701-3p，miR-4701-5p，miR-3162-3p等五种miRNA的表达水平具有统计学意义。与正常组比较，在非异常黑胆质型消化系统肿瘤组中miR-4731-3p，miR-4701-3p，miR-4701-5p等三种miRNA的表达具有统计学意义。与异常黑胆质型消化系统肿瘤组比较，在非异常黑胆质型消化系统肿瘤组中7种miRNA的表达均具有统计学意义。miR-4725-5p，miR-4731-3p，miR-4701-3p,miR-470-5p, miR-3162-3p等五种miRNA可能是异常黑胆质型消化系统肿瘤特异性上调表达miRNA。
　　结论:异常黑胆质型消化系统肿瘤发生发展与多种miRA的表达水平关系密切。miR-4725-5p，miR-4731-3p，miR-4701-3p，miR-4701-5p,miR-3162-3p等五种miRNA的表达水平的变化对异常黑胆质型消化系统肿瘤的标记作用可能具有一定的代表性。

目录

声明

中英文缩略词对照表

摘要

前言

研究内容与方法

1 研究对象

1．1 维医体液辨证分型

1．2 标本的收集

1．3 小样品标本(用于miRNA芯片)

1．4 大样品标本(用于miRNA real-timePCR)

1．5 主要仪器设备

1．6 主要试剂

2 研究方法

2．1 miRNA芯片检测过程

2．2 荧光定量PCR分析

3 统计学方法

结果

讨论

问题与展望

小结

致谢

参考文献

附录

综述 miRNA在肿瘤中的研究进展

攻读学位期间发表的学术论文

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