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鸡与鹌鹑属间杂交早期胚胎中bcl-2、P53、ER的发育性研究

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论文说明:本文部分缩写的中英文对照

声明

第一章文献综述

1鸡与鹌鹑远缘杂交研究进展

2家禽的性别控制的研究进展

3凋亡因子bcl-2、P53及其在鸡上的研究进展

4 ER的研究进展

第二章相对定量RT-PCR测定bcl-2、P53、ER mRNA丰度的条件优化

1材料与方法

2结果与分析

3讨论与小结

第三章Wpkci基因用于鸡与鹌鹑属间杂交早期胚胎性别鉴定

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4结论

第四章鸡与鹌鹑属间杂交早期胚胎中bcl-2、P53表达的差异及发育性变化

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4结论

第五章鸡与鹌鹑属间杂交早期胚胎中ER的差异表达及其作用

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4结论

结论与展望

参考文献

作者简介

致谢

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摘要

1、Wpkci基因用于鸡与鹌鹑属间杂交早期胚胎性别鉴定 本试验以杂交早期胚胎为研究对象,并以成年鹌鹑为外参照,利用鹌鹑Wpkci基因编码区设计引物,利用多重PCR技术,对早期胚胎的性别进行了研究。结果如下: 利用鹌鹑Wpkci基因编码区设计的引物建立了一种简单、快捷、可靠、稳定的杂交胚胎性别鉴别的方法。雌、雄性比率与理论值相比,雄性明显多于雌性,差异极显著;不同时间性别比率相比,差异不显著。早期死亡胚胎雌性明显多于雄性,并且雌性无特定死亡高峰期。 2、鸡与鹌鹁属间杂交早期胚胎中bcl-2、P53表达的差异及发育性变化 bcl-2、P53基因均是细胞凋亡的关键基因,目前鸡和鹌鹑早期胚胎发育各时间段bcl-2、P53基因表达模式的研究尚未见报道,本试验采集早期66、72、78、84、90、96、102、108、114、120 h的杂交活胚,利用相对定量RT-PCR方法,以β-actin为内标,在杂交种胚胎性别鉴定的基础上,检测bcl-2、P53表达的时序性。结果如下: 1)114 h雌性胚胎bcl-2 mRNA表达高峰点与其P5Mocl-2表达最低水平相吻合。 2)72h雌、雄胚胎P53 mRNA表达与P53/bcl-2表达水平一致,处于低谷点。 3)72、114h早期杂交胚胎bcl-2、P53基因表达出现异常。 3、鸡与鹌鹑属问杂交早期胚胎中雌激素受体(ER)表达的差异及发育性变化 研究表明雌激素在鸟类性别分化中起永久性作用,为此本研究利用相对定量RT-PCR方法测定杂交早期胚胎ER的相对丰度,结果如下: 66~84 h是ER表达高峰期,可以确定杂交种的性分化大致在这一时期;性分化期ER表达异常,雌性ER表达极显著高于雄性,78h雌性、雄性表达异常降低。

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